肉鸡固态复合微生态制剂的研制

微生态制剂论文 固体发酵论文 浅盘式发酵论文 促进肉鸡生长论文
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微生态制剂,又称为微生态调节剂,是指在微生态学理论指导下,用有利于人体或动物体的益生菌及代谢产物或生长促进物质制成的制剂。其具有增强机体免疫力、防治腹泻、缓解不耐乳糖症状、缓解过敏作用、预防癌症和抑制肿瘤生长等作用,已广泛应用于人类的日常生活中,并在畜牧业中成为抗生素的最主要的替代品之一。本试验以研制固态复合型微生态制剂为目的,筛选出适用于肉鸡的芽孢杆菌和酵母菌作为微生态制剂的备选菌株,优化出备选芽孢杆菌的固体发酵培养条件,观察了肉鸡固态复合微生态制剂的饲喂效果和初步研究了肉鸡肠道内容物,取得以下主要实验结果:1.微生态制剂菌株筛选。从实验室保藏的27株芽孢杆菌和13株酵母菌中筛选得到3株枯草芽孢杆菌(B395、B605和BMl)和1株酵母菌(Y13),作为适合应用于肉鸡饲养的微生态制剂的备选菌株。B395、B605和BM1均能在42℃正常生长,能抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,且能耐受0.3%胆盐,能产生淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶:热带假丝酵母Y13可耐受42℃。2.备选菌株固体发酵培养条件优化。选取BM1、B395作为实验菌株,以培养后活菌数为指标,进行正交实验和单因素实验对其固体发酵培养条件优化,得到BM1、B395的廉价固体发酵培养基和合适的培养条件。BM1为:麦麸:稻糠为1:1、湿度50%、尿素添加量为3%、葡萄糖0.5%.KH2P04 0.5%.接种量5%、培养3d。B395为:麦麸:稻糠为3:2、湿度40%、尿素添加量为2%、葡萄糖0.5%.KH2PO4 0.5%.接种量5%、培养3d。浅盘式发酵实验表明,BM1、B395、B605和Y13的活菌数分别达到1.79×1011 cfu/g.1.4×10cfu/g.5.2×109cfu/g和5.7×107cfu/g。并检测到固体发酵产物在室温下放置过程中芽孢杆菌可转化为芽孢,且芽孢转化率较高,在放置30天之后,其中的芽孢数基本稳定,因此将室温放置过程作为本产品生产过程的“后熟”阶段。3.肉鸡灌肠和饲喂实验。通过灌肠实验,初步确定备选芽孢杆菌BM1、B395和B605对肉鸡鸡雏无生物毒性。通过第一批次肉鸡饲喂实验,确定备选芽孢杆菌BM1、B395和B605可促进肉鸡增重(9.6%)和提高饲料转化率(2.4%),肯定了其具有实际应用潜力。将所制固体复合微生态制剂饲喂肉鸡,进行第二批次肉鸡饲喂实验。在28天连续喂饲后,菌剂加寡聚果糖、菌剂和寡聚果糖3个试验组肉鸡增重分别达到2.9%、9.8%和18.1%,并提高饲料转化率分别达到1.9%、0.6%和1.2%。4.肉鸡肠道内容物的初步研究。将微生物可培养技术和PCR-DGGE电泳用来分析肠道内容物。在有氧条件下培养乳酸类细菌和大肠杆菌,表明在菌剂加寡聚果糖试验组和寡聚果糖试验组中肉鸡盲肠乳酸类细菌的数量较对照组增加,在3个试验组中大肠杆菌数量较对照组减少,说明所喂饲微生态制剂对肉鸡肠道微生态环境造成了一定地影响。第二批次肉鸡饲喂实验结果和PCR-DGGE结果表明肠道肉鸡的新陈代谢和肠道菌群结构和多样性密切相关,观察到肉鸡十二指肠和盲肠肠道菌群随肉鸡个体生长变化较大,回肠肠道菌群则较小,并可推测肉鸡回肠肠道菌群多样性指数与肉鸡体重呈正相关,且肉鸡回肠肠道菌群多样性指数(香农指数)变化趋势与生态学中的“中度干扰假说”一致。本试验筛选得到较优良的微生态制剂菌株,并对其进行固体发酵优化,为实际生产提供一定的技术支持;考察了肉鸡饲喂试验结果,并初步研究了肉鸡肠道菌群变化’状况,为优化微生态制剂组成和实际使用剂量提供一定的理论参考。
摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 前言第10-22页
    1.1 微生态制剂研制及相关研究进展第11-21页
        1.1.1 益生菌的历史及研究进展第11-17页
        1.1.2 固态发酵的历史及研究进展第17页
        1.1.3 动物肠道菌群及其与动物机体免疫之间的关系第17-21页
    1.2 研究的目的和意义第21-22页
2 材料和方法第22-31页
    2.1 材料第22-26页
        2.1.1 实验菌株第22页
        2.1.2 实验动物及饲料第22-23页
        2.1.3 主要仪器第23页
        2.1.4 主要药品与试剂第23-25页
        2.1.5 培养基第25-26页
    2.2 方法第26-31页
        2.2.1 微生态制剂菌株筛选第26-27页
        2.2.2 备选菌株固体发酵培养条件的优化第27-28页
        2.2.3 肉鸡饲喂实验第28-29页
        2.2.4 肉鸡肠道内容物的初步研究第29-31页
3 结果与分析第31-64页
    3.1 微生态制剂菌株筛选第31-36页
        3.1.1 芽孢杆菌的筛选结果第31-34页
        3.1.2 酵母筛选结果第34-36页
    3.2 备选菌株固体发酵培养条件优化结果第36-44页
        3.2.1 BM1和B395固体发酵培养条件正交试验结果第36-38页
        3.2.2 BM1和B395固体发酵条件单因素实验结果第38-40页
        3.2.3 BM1和B395产芽孢条件试验结果第40-43页
        3.2.4 浅盘式发酵实验结果第43-44页
    3.3 肉鸡饲喂实验结果第44-48页
        3.3.1 菌液灌肠实验结果第44页
        3.3.2 第一批次肉鸡饲喂实验结果第44-45页
        3.3.3 第二批次肉鸡饲喂实验结果第45-48页
    3.4 肉鸡肠道内容物的初步研究第48-64页
        3.4.1 肠道内容物可培养微生物检测结果第48-50页
        3.4.2 肉鸡肠道菌群PCR-DGGE结果第50-64页
4 讨论第64-68页
    4.1 微生态制剂菌株筛选第64页
    4.2 备选菌株固体发酵培养条件优化第64-65页
    4.3 肉鸡饲喂实验第65-66页
    4.4 肉鸡肠道内容物的初步研究第66-68页
5 结论第68-71页
参考文献第71-77页
攻读硕士学位期间发表的论文第77-78页
致谢第78页
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