1. 人乳头瘤病毒16型外壳蛋白高效表达系统的构建及目的蛋白的表达 2. HPV16型病毒蛋白血清学检测对宫颈癌前病变病情监测价值的初步探讨

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目的:探讨突变型HPV16L1基因在原核表达系统中的高效表达:初步探讨利用原核系统表达的复性L1蛋白检测抗HPV16L1抗体的血清学方法在宫颈癌前病变病情监测中的价值。 方法:利用基因重组技术构建含有突变型HPV16L1全长基因的重组质粒,在大肠杆菌中诱导目的蛋白的表达,亲和层析法纯化目的蛋白并经SephadexG-100凝胶柱复性。分别以变性和复性的突变型L1蛋白为抗原用酶联免疫法检测不同宫颈病变患者血清中的IgG抗体。 结果:经SDS-PAGE电泳及western blot鉴定,成功地构建了含突变型L1基因的重组质粒,获得高效表达的目的蛋白L1(m202)。ELISA检测显示:以变性L1(m202)蛋白为抗原检测,宫颈癌、CIN患者和正常或慢性宫颈炎妇女(对照组)血清IgG阳性率分别为16.0%、10.5%和9.1%,三者间无显著差异,HPV-DNA阳性的CIN患者阳性率为12.5%,与对照组无显著差异。以复性的L1(m202)蛋白为抗原进行检测,宫颈癌、CIN患者和对照组血清IgG阳性率分别为16.0%、35.5%和15.9%,CIN患者的阳性率显著高于宫颈癌患者和对照组,HPV-DNA阳性的CIN患者血清抗体阳性率为32.5%,显著高于对照组。 结论:血清中抗变性L1蛋白的抗体与宫颈病变无相关性;以复性L1蛋白为抗原的血清ELISA检测方法可用于检测HPV感染后人体产生的针对构象表位的抗体,还需增加研究对象以确定该检测方法用于HPV血清流行病学研究及宫颈癌前病变病情监测的可行性。
论文综述第4-20页
中文摘要第20-21页
英文摘要第21页
第一部分 人乳头瘤病毒16型外壳蛋白高效表达系统的构建及目的蛋白的表达第22-41页
    前言第22页
    材料与方法第22-31页
    结果第31-39页
    讨论第39-41页
第二部分 HPV 16型病毒蛋白血清学检测对宫颈癌前病变病情监测价值的初步探讨第41-50页
    前言第41-42页
    材料与方法第42-44页
    结果第44-47页
    讨论第47-50页
参考文献第50-66页
致谢第66页
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