本文通过体外犊牛肝细胞的原代培养实验,运用荧光定量逆转录PCR和ELISA等实验方法,检测了外源性游离脂肪酸(也称非酯化脂肪酸,Nonesterified fatty acids,NEFA)、β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)以及葡萄糖(Glucose,GLU)对体外培养牛肝细胞中脂肪酸代谢途径的关键酶肉碱脂酰转移酶Ⅰ(carnitine palmityl transferaseⅠ,CPT-Ⅰ)在转录水平、翻译水平上的影响,探讨了NEFA、BHBA以及GLU对奶牛肝脏脂肪酸氧化代谢途径关键酶的调控作用,从而为进一步确证酮病奶牛肝脏脂肪酸氧化代谢途径特征、主要制约因素和关键环节提供了理论基础和实验依据。体外肝细胞培养液中添加外源性NEFA,实验结果表明:体外培养牛肝细胞中低浓度范围的NEFA,可提高CPT-Ⅰ转录水平和翻译水平,呈剂量依赖性。但过高浓度的NEFA则严重抑制CPT-Ⅰ基因的转录和翻译;体外肝细胞培养液中添加外源性BHBA,实验结果表明:BHBA可显著降低CPT-Ⅰ转录水平和翻译水平,并呈剂量依赖性;体外肝细胞培养液中添加外源性GLU,实验结果表明:GLU可提高CPT-Ⅰ转录水平,亦呈剂量依赖性,但GLU对肝细胞CPT-Ⅰ在翻译水平上则没有明显的调控作用。因此,通过探明体外肝细胞培养液中添加NEFA、BHBA以及GLU对肝细胞中脂肪酸代谢途径的关键酶CPT-Ⅰ的调控作用,推测围产期奶牛血液中NEFA、BHBA和GLU等与能量代谢有关的代谢信号对肝脏脂肪酸的氧化可能具有调控作用。
