晚期糖基化终末产物对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖和蛋白激酶C活性的影响

目的： 研究晚期糖基化终末产物(AGEs)对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(SMCs)增殖和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。探讨AGEs引起血管SMCs增殖的信号传导途径及其在糖尿病大血管病变中的可能地位。 方法： (1)牛血清白蛋白(BSA)与葡萄糖共同孵育制备成AGEs-BSA，用荧光分光光度计测定AGEs-BSA的荧光强度。 (2)以AGEs-BSA或预先加入PKC抑制剂干预Sprague-Dawley(SD)大鼠的主动脉SMCs，采用细胞计数法、四氮唑蓝(MTT)法、~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法测定细胞增殖。 (3)采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定经AGEs-BSA干预后的大鼠主动脉SMCs颗粒部分的PKC活性和细胞浆PKC活性。 结果： (1)AGEs-BSA的荧光强度随着葡萄糖浓度的增加和糖基化时间的延长而增强。 (2)细胞计数法、MTT法和~3H-TdR掺入法均表明葡萄糖浓度越高、糖基化时间越长形成的AGEs-BSA引起大鼠主动脉SMCs数目增加的越多。且AGEs-BSA致SMCs的数目增加呈时间依赖性和剂量依赖性。预先加入PKC抑制剂可以明显抑制SMCs的增殖。 (3)与葡萄糖浓度越高、糖基化时间越长形成的AGEs-BSA一起孵育的SMCs的颗粒部分的PKC活性越高，细胞浆的PKC活性越低。 结论： AGES可能通过激活PKC引起平滑肌细胞的增殖，这种效应随着葡萄糖浓度的升高和糖基化时间的延长而增大。提示糖尿病病人血糖越高，病程越长，形成的AGEs可能越多，可能引起糖尿病大血管病变的危险性越大。