甘肃省马铃薯晚疫病菌的群体遗传多样性分析

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由致病疫霉菌(Phytophthora infestans (Mont.) de Bary)引起的晚疫病已成为马铃薯生产上的一种毁灭性病害,严重威胁着马铃薯的安全生产。病原菌群体结构的组成与变化直接影响着病害的发生与流行。因此,了解病原菌的群体结构,分析其变异潜能,对指导病害防控具有重要意义。我国马铃薯总产量居世界第一位,甘肃省是我国马铃薯生产的最佳适宜区之一,也是我国重要的马铃薯种薯生产区和商品薯种植大省。本研究主要是对我国甘肃省马铃薯晚疫病病样进行采集和分离,测定交配型,并通过SSR分子标记技术进行群体遗传多样性分析。主要结果如下:1.2008年和2009年共分离得到来自甘肃省的致病疫霉菌分离物246个。2.对其中181株分离物测定了交配型,共检测到119株A1交配型菌株,62株A2交配型菌株。A2交配型在安定、漳县、庄浪、渭源的分离物中所占有的比例分别为:87%,25%,21%,13%;在2008年和2009年的分离物中所占有的比例分别为:26%和40%。结果表明:A2交配型菌株已在甘肃省马铃薯种植区有所分布,并且有增加的趋势。3.利用8个SSR标记对两年的分离物进行了微卫星分子标记分析。2008年70株分离物,检测到22个基因型,其中有两个优势基因型分别占总基因型数的38.6%和21.4%。176株2009年的致病疫霉菌被划分为87个基因型,其中渭源地区的基因型最丰富,其基因型数占总基因型数的54%。两年共246个分离物检测到105个基因型,2008年和2009年的基因型数/菌株数分别为30%和49%。结果表明:甘肃省马铃薯晚疫病菌存在较高的遗传多样性;不同的年份病菌基因型差异明显,表明种薯带菌是病菌重要的初侵染来源;同一种基因型在不同地区的出现表明病菌菌源交流的存在,而且可能通过种薯调运传播;同一种基因型在不同年份的出现表明,薯块带菌是病菌的初侵染来源之一。本研究结果将有助于认识甘肃省马铃薯晚疫病菌的生活史循环以及晚疫病的流行特征。
摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第11-17页
    1.1 马铃薯晚疫病的重要性和危害性第11页
    1.2 致病疫霉菌的概述第11-15页
        1.2.1 致病疫霉菌的分类地位第11-12页
        1.2.2 致病疫霉菌的生物学特征第12页
        1.2.3 致病疫霉菌的侵染机理第12-13页
        1.2.4 致病疫霉菌的生活史第13-14页
        1.2.5 致病疫霉菌的危害症状和传播途径第14-15页
    1.3 国内外致病疫霉菌群体遗传多样性的研究进展第15-16页
    1.4 本研究的目的和意义第16-17页
第二章 致病疫霉菌的获得和交配型的测定第17-25页
    2.1 病样的采集第17-18页
        2.1.1 采集时间第17-18页
        2.1.2 采集方法第18页
        2.1.3 样本保存第18页
        2.1.4 采样结果与讨论第18页
    2.2 病菌的分离第18-20页
        2.2.1 培养基的配制第18-19页
        2.2.2 直接分离法第19页
        2.2.3 马铃薯薯块诱导分离法第19-20页
        2.2.4 致病疫霉菌分离结果与讨论第20页
    2.3 病菌的保存第20-21页
        2.3.1 菌种瓶保存第20页
        2.3.2 液氮灌保存第20-21页
    2.4 菌丝的收集第21页
    2.5 致病疫霉菌交配型的测定第21-25页
        2.5.1 实验材料第21页
        2.5.2 实验方法第21-22页
        2.5.3 实验结果第22-24页
        2.5.4 讨论与分析第24-25页
第三章 致病疫霉菌的SSR 分析第25-34页
    3.1 实验材料第25页
    3.2 实验方法第25-28页
        3.2.1 DNA 的提取第25页
        3.2.2 DNA 纯度与浓度的检测第25-26页
        3.2.3 PCR 扩增第26-27页
        3.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳第27-28页
        3.2.5 数据分析第28页
    3.3 实验结果与讨论第28-34页
        3.3.1 基因型的鉴定第28-32页
        3.3.2 讨论与分析第32-34页
参考文献第34-37页
附录第37-40页
致谢第40-41页
作者简介第41页
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