草莓镶脉病毒侵染性克隆鉴定及其反式激活因子功能分析

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论文详情
致谢第4-5页
摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
文献综述第13-19页
    1 草莓镶脉病毒第13-14页
        1.1 草莓镶脉病毒的分类及其主要特性第13页
        1.2 草莓镶脉病毒基因组结构及其编码的蛋白及功能第13-14页
    2 植物病毒侵染性克隆与病毒载体第14-15页
        2.1 植物病毒侵染性克隆第14页
        2.2 植物病毒载体第14-15页
        2.3 植物病毒侵染性克隆接种方法第15页
    3 真核细胞基因翻译再起始第15-19页
        3.1 真核细胞基因翻译再起始概述第15-16页
        3.2 CaMV病毒反式激活因子的研究进展第16-19页
            3.2.1 反式激活因子简介第16页
            3.2.2 CaMV反式激活因子TAV,调控多顺反子mRNA的翻译第16-17页
            3.2.3 TAV与寄主体内翻译因子的互作研究第17-19页
引言第19-21页
材料与方法第21-27页
    1 材料第21页
        1.1 植物材料第21页
        1.2 菌株、质粒和载体第21页
        1.3 酶和常用试剂第21页
        1.4 常用缓冲溶液第21页
        1.5 常用实验仪器第21页
    2 方法第21-27页
        2.1 草莓叶片总DNA的提取第21-22页
            2.1.1 CTAB抽提液配制第21-22页
            2.1.2 CTAB法提取草莓叶片总DNA操作步骤第22页
        2.2 总RNA的提取第22页
        2.3 PCR技术第22-23页
            2.3.1 Taq酶反应体系配制第22页
            2.3.2 Taq酶反应程序设置第22-23页
        2.4 基因的克隆步骤第23-25页
            2.4.1 高保真酶PCR扩增第23页
            2.4.2 高保真酶PCR扩增反应程序设置第23页
            2.4.3 PCR产物生成粘性末端第23页
            2.4.4 DNA产物的连接第23-24页
            2.4.5 大肠杆菌感受态细胞的制备第24页
            2.4.6 农杆菌感受态细胞的制备第24-25页
            2.4.7 质粒提取第25页
        2.5 农杆菌接种第25页
            2.5.1 农杆菌浸润本氏烟第25页
            2.5.2 SVBV侵染性克隆接种森林草莓第25页
        2.6 双顺反子的克隆构建第25-26页
            2.6.1 引物设计第25页
            2.6.2 双顺反子的克隆第25-26页
        2.7 植物蛋白提取第26-27页
结果与分析第27-38页
    1 SVBV侵染性克隆的侵染性鉴定和检测第27-30页
        1.1 SVBV侵染性克隆真空抽滤法接种草莓第27-28页
        1.2 SVBV沈阳分离物侵染性克隆具有侵染性第28-29页
        1.3 SVBV沈阳分离物侵染性克隆接种森林草莓的检测第29-30页
    2 SVBV病毒载体的侵染性鉴定第30-32页
        2.1 SVBV病毒载体具有侵染性第30-32页
    3 SVBV病毒侵染性克隆能够反式激活双顺反子表达第32-34页
        3.1 SVBV病毒侵染性克隆能够反式激活CaMV双顺反子表达第32-34页
    4 SVBV病毒反式激活因子的鉴定第34-36页
        4.1 除P6外病毒其他各ORF蛋白均不能反式激活双顺反子表达第34-35页
        4.2 P6蛋白能够反式激活不同病毒来源双顺反子表达第35-36页
    5 P6蛋白反式激活功能域的探究第36-38页
        5.1 P6蛋白各个突变体均不能反式激活双顺反子表达第36-38页
讨论第38-40页
    1 SVBV病毒侵染性克隆的接种方法第38页
    2 SVBV病毒载体的构建第38页
    3 P6反式激活功能域的研究第38页
    4 P6对反式激活翻译过程的调控机制第38-40页
结论第40-41页
参考文献第41-45页
作者简介第45页
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