二种抗中性粒细胞胞浆抗体检验方法学比较及ANCA相关性肾炎的靶抗原实验研究

抗中性粒细胞胞浆抗体论文 抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎论文 抗中性粒细胞胞浆抗体相关性肾小球肾炎
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目的探讨间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,ⅡF)和酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)对抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测结果一致性,分析ANCA相关性血管炎(anti-neutrophil cytoplasmic antibodies,AAV)患者器官受累特点及其靶抗原在ANCA相关性肾小球肾炎(ANCA associated glomerularnephritis,ANCA-associated GN)患者中的表达。方法收集2011年7月至2013年5月天津医科大学总医院临床科室提交非重复ANCA检测标本3852份及相关患者病例资料,应用IIF法和ELISA法联合对标本进行ANCA检测。对87例确诊为AAV的患者病例资料进行回顾性分析,并筛选经肾活检证实的未治疗的ANCA associated GN患者33例和30例健康人群做为正常对照,采用IIF法和ELISA法检测ANCA结果及血清中溶酶体相关膜蛋白-2(lysosomal-associated membrane protein-2,LAMP-2)抗体的水平,并观察其中25例ANCA associated GN患者活动期及好转后LAMP-2抗体的动态变化,分析其与疾病活动度及肾损害的相关性。结果ELISA法检测ANCA的阳性率高于IIF法(χ2=14.405,p<0.001),二种检测方法总体符合率为94.93%(Kappa=0.611,p<0.001); ELISA法漏检率为1.84%,IIF法漏检率为3.21%;IIF法在抗PR3阳性标本组和抗杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal permeability increasing protein,BPI)阳性标本组的漏检率高于抗MPO阳性标本组(x2=25.050, p<0.001; x2=11.623, p<0.001)。 AAV患者以60岁以上老年人男性多见,患病类型以显微镜下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)多见,患者多出现肾脏受累。未治疗ANCA associated GN组患者血清中LAMP-2抗体的均值高于缓解期ANCA-associated GN组患者和正常对照,结果差异具有统计学意义(P<0.001)。ANCA associated GN患者疾病缓解后与正常对照血清中LAMP-2抗体的水平差异无统计学意义(p>0.05)。在未治疗ANCA associated GN组IIF镜下表现为不典型ANCA荧光模式患者与镜下表现为其他荧光模式患者血清中LAMP-2抗体的平均值差异有统计学意义(p<0.05)。相关性分析显示,未治疗ANCA associated GN患者血清中LAMP-2抗体分别与ESR、Cr、BUN、24小时尿蛋白定量、新月体比例、BVAS呈正相关,与ALB、Hb、CCr、呈负相关。结论通过对3852份患者血清标本进行ANCA检测,结果显示二种检测方法总体符合率为94.93%(Kappa=0.611,p<0.001), ELISA法的漏检标本占所有阳性标本的19.34%,而IIF法的漏检标本则达到所有阳性标本的33.78%。若单独使用一种方法进行ANCA检测,将会导致高比例的阳性标本漏检。对临床怀疑为小血管炎、风湿性疾病以及肺间质纤维化的患者同时采用二种方法检测ANCA,以减少相关疾病的漏诊是十分必要的。LAMP-2抗体与ANCA-associatedGN疾病活动及肾损害严重程度有一定相关性。可能是判断NCA associated GN病情活动和缓解的一个有效指标。
中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第10-11页
前言第11-14页
    研究现状、成果第11-13页
    研究目的、方法第13-14页
一、二种方法检测抗中性粒细胞胞浆抗体的结果一致性实验研究分析第14-21页
    1.1 研究对象和方法第14-17页
        1.1.1 材料第14-15页
        1.1.2 方法第15-17页
    1.2 结果第17-19页
        1.2.1 ELISA-ANCA和IIF-ANCA检测结果总体分布第17页
        1.2.2 单独使用IIF法导致漏检的ANCA特异性抗原标志物结果第17-18页
        1.2.3 二种方法在不同疾病中漏检情况分析第18-19页
    1.3 讨论第19-20页
        1.3.1 2种方法检测结果总体分析第19页
        1.3.2 单独使用IIF法导致漏检的ANCA特异性抗原标志物结果分析第19-20页
    1.4 小结第20-21页
二、87例ANCA相关系统性血管炎患者临床及病理诊断分析第21-26页
    2.1 材料和方法第21页
        2.1.1 患者资料第21页
        2.1.2 方法第21页
    2.2 结果第21-24页
        2.2.1 AAV患者系统受累临床表现第21-22页
        2.2.2 AAV患者系统受累临床表现第22页
        2.2.3 AAV患者合并感染情况第22-23页
        2.2.4 AAV患者肺部影像学特征第23页
        2.2.5 AAV患者实验室检查结果第23-24页
        2.2.6 AAV患者肾脏病理学特点第24页
    2.3 讨论第24-25页
        2.3.1 AAV患者一般资料分析结果第24页
        2.3.2 AAV患者受累系统及临床表现分析第24-25页
        2.3.3 AAV患者ANCA检测结果第25页
    2.4 小结第25-26页
三、溶酶体相关膜蛋白-2抗体在ANCA相关性肾小球肾炎患者血清中表达水平及临床意义探讨第26-35页
    3.1 材料和方法第27-29页
        3.1.1 材料第27-28页
        3.1.2 方法第28-29页
    3.2 结果第29-33页
        3.2.1 ANCA检测结果第29-30页
        3.2.2 ANCA其他纯化靶抗原检测结果第30-31页
        3.2.3 血清中LAMP-2抗体的水平检测结果第31页
        3.2.4 未治疔ANCA-associated GN患者血清中LAIWP-2抗体水平与肾损害严重程度及BVAS的相关性分析结果第31-33页
    3.3 讨论第33页
        3.3.1 ANCA-associated GN患者血清LAMP-2抗体水平高表达的意义第33页
    3.4 小结第33-35页
结论第35-36页
参考文献第36-40页
发表论文情况说明第40-41页
综述第41-57页
    综述参考文献第51-57页
致谢第57页
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