草莓镶脉病毒移动蛋白P1和森林草莓叶绿素a/b结合蛋白LHC Ⅱ互作机制研究

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论文详情
致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-9页
文献综述第12-16页
    1 草莓镶脉病毒研究现状第12-13页
        1.1 草莓镶脉病毒主要特性及发生地区第12页
        1.2 草莓镶脉病毒的全基因组及编码的蛋白和功能第12页
        1.3 SVBV的研究情况第12-13页
    2 在细胞间移动蛋白介导病毒运动的机制第13-14页
        2.1 病毒移动蛋白与植物蛋白的互作第13-14页
        2.2 利用酵母双杂交系统筛选与SVBV P1蛋白互作的寄主因子第14页
    3 叶绿素a/b结合蛋白(LHC Ⅱ)的结构及生物学功能第14-16页
        3.1 叶绿体蛋白参与病毒侵染过程第15-16页
引言第16-17页
材料和方法第17-22页
    1 材料第17页
        1.1 病毒材料来源第17页
        1.2 模式植物第17页
        1.3 菌种第17页
        1.4 载体和质粒第17页
        1.5 酶和常用试剂第17页
    2 试验方法第17-22页
        2.1 带毒草莓叶片总RNA的提取第17-18页
        2.2 目的片段的PCR扩增第18页
        2.3 PCR产物回收第18页
        2.4 载体构建第18-20页
        2.5 免疫共沉淀(pull-down)验证P1与LHC Ⅱ互作第20-21页
        2.6 免疫共沉淀(Co-IP)验证P1与LHC Ⅱ互作(invivo)第21-22页
结果与分析第22-33页
    1 利用酵母双杂交系统筛选与SVBVP1蛋白互作的寄主因子第22-24页
        1.1 P1蛋白的毒性和自激活的检测第22页
        1.2 阳性酵母菌株的筛选第22-23页
        1.3 PCR筛选酵母菌阳性克隆第23页
        1.4 森林草莓中与SVBVP1蛋白互作的寄主因子第23-24页
    2 SVBVP1蛋白和LHC Ⅱ蛋白的互作研究第24-30页
        2.1 Real-timeRT-PCR分析森林草莓LHC Ⅱ基因的mRNA积累水平第24-25页
        2.2 P1和LHC Ⅱ亚细胞定位及共定位第25-26页
        2.3 酵母双杂(Y2H)验证P1与LHC Ⅱ互作第26-27页
        2.4 双分子荧光互补(BiFC)验证P1与LHC Ⅱ互作第27-28页
        2.5 免疫共沉淀(Pull-down)验证P1与LHC Ⅱ互作第28-29页
        2.6 免疫共沉淀(Co-IP)验证P1与LHC Ⅱ互作第29-30页
    3 P1与LHC Ⅱ互作对病毒侵染与扩散的机制研究第30-33页
        3.1 P1蛋白超表达对本氏烟植株的影响第30-31页
        3.2 LHC Ⅱ蛋白能协助P1蛋白,促进病毒局部扩散第31-33页
讨论第33-36页
    1 利用酵母双杂交系统筛选与SVBV P1蛋白互作的寄主因子第33页
    2 Real-time RT-PCR分析森林草莓LHC Ⅱ基因的RNA积累水平第33页
    3 P1和LHC Ⅱ亚细胞定位及共定位第33-34页
    4 P1蛋白和LHC Ⅱ蛋白互作研究第34页
    5 本氏烟的转化和P1转基因植株的获得第34-35页
    6 LHC Ⅱ蛋白的表达能帮助P1蛋白促进病毒局部扩散第35-36页
总结第36-37页
参考文献第37-42页
作者简介第42页
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