目的：①通过利用SPECT动态显像技术对不同剂量L-NAME致兔高血压性肾损伤模型测定肾功能,判断分侧肾功能改变,并对肾脏的摄取、排泄功能等进行半定量分析。为肾功能半定量评估肾损伤临床前期和临床期间的药物依赖性肾损伤程度的纵向深入研究奠定实验基础并提供影像学依据。②评估MSCT检查技术动态观察不同剂量L-NAME致兔肾功能损伤程度的可行性,利用CT灌注参数及肾小球滤过率(GFR)对肾损伤程度进行量化评估,并将GFRCT与GFRSPECTt相比较,观察两者是否有相关性及相关程度,进一步探讨MSCT功能检查对评估肾功能,特别是分侧肾功能变化的价值。对象与方法：第一部分：选择体重2.5-3kg的雌性新西兰大白兔31只随机分为3组：对照组(n=9),将0.9% NaCl溶液按2ml/kg通过耳缘静脉导管团汁,后将该溶液使用微量输液泵在30min内以0.17ml/min/kg速率恒定输注;小剂量(L-NAME3,3 mg/kg)组(n=12)和大剂量((?)-NAME10. 10mg/kg)组(n=10).即将L-NAME配成50mg/ml浓度溶液,再分别按照3mg/kg和10mg/kg两种剂量各稀释成7.1ml/kg的药液,再按2ml/kg通过耳缘静脉团注后使用微量输液泵在30min内以0.17ml/min/kg速率恒定输注上述特定剂量实验用药,在注射完毕后15min内完成SPECT检查并取病理。观察三组实验兔双肾SPECT动态显像情况、对三组实验兔肾GFR、达峰时间(TTP)、半排时间(T1/2)变化私度进行分析比较。同时于注药前后,分别取血检测血肌酐及红细胞压积,并比较三组实验兔注药前后血肌酐(Cr)的变化。因血压测量具有创伤性,故另外选取15只兔随机分为对照组(n=5)、L-NAME3红(n=5)和L-NAME10组(n=5),手术暴露并分离左股动脉后插管,连接压力表测量兔麻醉状态下收缩压(SBP)观测不同剂量L-NAME致血压呈剂量依赖性升高的变化程度,注药力法同前。比较三组实验兔注前后SBP的变化。第二部分：选择20只兔随机分为对照组(n=6)、L-NAME3组(n=6)和L-NAME10组(n=8),注药方法同前。在注药完毕后5min内完成MSCT检查,其中15只兔于24小时内行SPECT检查,最后取病理,分别记录实验兔肾皮质、外髓、内髓及肾实质的BF、BV、MTT、PS、峰傎、峰时等参数值,比较上述数据差异有无统计学意义。将原始数据传入东北大学开发的后处理工作站进行相关处理,根据Patlak公式计算分侧肾GFRCT。再将GFRCT与GFRSPECT值进行相关性比较及一致性分析。肉眼观察肾脏的形态、大小、肾盏及肾盏的变化、肾皮髓质界限、有无缺血、淤血及其他病变;光镜下主要观察肾小球及肾小管形态、结构变化。统计学分析采用软件SPSS for windows 13.0统计软件包完成。组内数据采用配对资料t检验,组间比较采用单变量方差分析( one-way ANOVA),同时进行多重比较(Bonferroni校正),p<0.05为有统计学意义。GFRCT与GFRSPECT值的相关性及一致性采用Bland-Altman分析及Spearman秩相关分析,p<0.05表示显著相关。结果：第一部分：实验兔的血压随静脉注入不同剂量L-NAME后呈剂量依赖性增高,其相应GFR呈不同程度减低,L-NAME致兔高血压性肾损伤模型成功建立。三组实验兔注药前后血肌酐(Cr)无变化。L-NAME3组GFR与对照组相比轻度下降,但差异无统计学意义。L-NAME10组GFR明显低于对照组及L-NAME3组,且差异有统计学意义。以35 ml/min为标准诊断肾功能显著受损的灵敏度、特异度均为100％.L-NAME3组及L-NAME10组与对照组比较TTP及T1/2的差异均有统计学意义(P<0.005),但前两者间TTP及T1/2差异无统计学意义。第二部分：L-NAME3组和L-NAME10组与对照组相比,前两者的肾皮质、外髓、内髓、实质区与后者相应各部位的BF、Bv、PS灌注值之间的差异均有统计学意义(P<0.05),且L-NAME3组和L-NAME10组两组之间的肾皮质区的BF和BV差异也有统计学意义,L-NAME10组肾皮质区的BF和BV明显低于L-NAME3组。L-NAME10组肾皮质与外髓所得BF、BV与L-NAME3组相比差异有统计学意义,而L-NAME10组肾皮质与外髓区所得PS、肾内髓及肾实质区所得BF.BV.PS与L-NAME3组相比差异没有统计学意义。3个实验组肾皮质、外髓、内髓及实质区之间的MTT差异无统计学意义。L-NAME3组和L-NAME10组肾皮质、外髓、内髓及实质区的峰值均低于对照组,前两者与后者的峰值相比差异均有统计学意义(P<0.05),且L-NAME3组和L-NAME10组之间的峰值差异也有统计学意义,L-NAME10组峰值明显低于L-NAME3组。L-NAME3(?)组和L-NAME10组肾皮质、外髓及实质区的达峰时间均较对照组明显延长,前两者与后者的达峰时间相比差异均有统计学意义(P<0.05),但L-NAME3组和L-NAME10组肾皮质、外髓、实质区之间的达峰时间无明显差异。L-NAME3组GFRCT与对照组GFRCT比较两者差异无统计学意义。L-NAME10组GFRCT与对照组比较明显减低,两者差异有统计学意义(P=0.000),且L-NAME10组GFRCT均值亦低于L-NAME3组,两者间差异有统计学意义(P=0.000)。L-NAME3组GFRSPECT(?)与对照组GFRSPECT比较,两者间差异无统计学意义。L-NAME10组GFRSPECT值明显低于对对照组及L-NAME3组,组间差异有统计学意义(P=0.000)。以GFRSPECT为标准,对GFRCT和GFRSPECT进行Spearman秩相关和秩回归分析。对照组GFRSPECT=8.074+0.920GFRCT(n=10,γ=0.941,R2=0.886,p<0.05)；L-NAME3组GFRSPECT=4.370+1.064GFRCT(n=8,γ=0.954,R2=0.911,p<0.05)；L-NAME10组GFRSPECT=7.053+0.843GFRCT(n=12,γ=0.913,R2=0.833,p<0.05)。各组间相关系数在0.913～0.954之间,两种测量方法分别得到的GFRCT及GFRSPECT具有高度相关性。同时,三组的确定系数接近,在0.833～0.911之间(p<0.05),即三组GFRCT及GFRSPECT结果一致性无明显差别。病理表现：光镜下对照组兔肾小球及肾小管形态、结构清晰；大体镜下L-NAME3组出现肾皮、髓质界限不清晰,肾内出现少量缺血改变,肾小管上皮细胞肿胀,或脂肪变性及空泡变性；L-NAME10组肾损伤较前两组严重,肾盂、肾盏结构欠完整,肾皮、髓质界限部分清晰、肾内存在肾缺血、淤血等病变。光镜下见肾小管上皮细胞肿胀、脂肪变性和空泡变性等,肾小管内可见大量管型形成及肾小管上皮细胞坏死、肾间质水肿。结论：①L-NAME作为肾功能介质NOS时选择性抑制剂可造成剂重依赖性血压增高,成功建立兔高血压肾损协模型。②短时间内利用SPECT检查即可观察到肾血流动力学变化,对肾脏,特别是分侧肾的摄取、排泄功能等情况进行半定量分析,可为肾脏功能受损新的治疗方法的临床动态评价奠定实验基础。③使用MSCT检查所测得肾脏的各项参数,特别是利用Patlak公式计算分侧肾小球率过滤(GFRCT),可以直观并定量反映肾脏功能变化,且与SPECT所测结果具有较高的一致性。④MSCT与SPECT检查相结合,具有高度客观性、直观性,还可为临床动态观察及评价关于药物依赖性肾损伤的程度及临床早期发现肾脏病变提供重要影像学依据。
