血管紧张素-（1-7）对THP-1源性泡沫细胞胆固醇外流的影响及机制探讨

目的本实验通过构建THP-1源性泡沫细胞模型，探讨Ang-（1-7）和腺苷酸环化酶的抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1表达和胆固醇含量的影响。进一步阐明Ang-（1-7）抑制动脉粥样硬化形成的机制。方法培养THP-1源性单核细胞，用佛波酯（PMA）（160 nmol/L）诱导为巨噬细胞，加入终浓度为50 mg/L的ox-LDL建立泡沫细胞模型。实验分为4组，A组：正常泡沫细胞组；B组：腺苷酸环化酶抑制剂MDL组（简称MDL组）；C组：Ang-（1-7）组；D组：MDL+Ang-（1-7）组。处理24 h后，ELISA法检测各组细胞cAMP表达水平，实时荧光定量RT-PCR法和Western-blot检测各组细胞ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量，闪烁计数法检测各组细胞胆固醇流出率，高效液相法检测各组细胞胆固醇含量。结果（1）MDL组与泡沫细胞组相比cAMP表达水平、ABCA1mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量及胆固醇流出率明显降低（P < 0.05），细胞内胆固醇含量增高（P < 0.05）；Ang-（1-7）组cAMP表达水平、ABCA1mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量明显升高（P < 0.05），胆固醇流出率增高（P < 0.05），胆固醇含量显著降低（P < 0.05）；（2）与Ang-（1-7）组比较，MDL+Ang（-1-7）组cAMP表达水平、ABCA1mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量明显降低（P < 0.05），胆固醇流出率降低（P < 0.05），胆固醇含量增高（P < 0.05）。结论（1）Ang-（1-7）能促进泡沫细胞ABCA1表达增加，增加胆固醇流出率，减少泡沫细胞胆固醇含量，逆转泡沫细胞的形成。（2）MDL可以抑制腺苷酸环化酶的活性，减少cAMP的生成，从而部分拮抗Ang-（1-7）的上述作用，但不能完全阻断Ang-（1-7）的作用。