GDNF及dbcAMP对神经干细胞诱导分化为多巴胺能神经元作用的实验研究

神经干细胞是一类能够自我更新、具有多分化潜能的母细胞，在特定的环境下具有分化为神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞的能力。正是由于这些特性，使得神经干细胞成为细胞替代治疗的理想选择，为神经系统损伤和变性疾病（帕金森病）的治疗带来了新的希望，本试验通过利用GDNF及dbcAMP对大鼠胚胎神经干细胞进行定向分化，从而获得相当数量的多巴胺能细胞，为下一步的细胞移植打下基础。方法：分离培养孕14-16天Wistar大鼠大脑神经干细胞，通过传代培养来检测其自我更新能力，并对其进行Nestin及Brdu蛋白鉴定，利用GDNF及dbcAMP对大鼠神经干细胞进行定向分化，通过免疫细胞化学及免疫荧光等方法检测TH阳性细胞表达。结果：培养的神经干细胞均表达Nestin及Brdu，体外培养1周后神经球的数量显著增加，体积增大；GDNF及dbcAMP均能提高TH表达，与血清对照组比较有显著差异（p<0.05）。结论：在神经营养因子的作用下，分离的神经干细胞能够快速增殖并形成神经球，GDNF及dbcAMP均有诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的作用，其中GDNF在20ug/l时诱导效能最高，dbcAMP在200umol/l时诱导效能最高，二者均存在剂量依赖性，二者联合诱导与各自单独诱导对提高TH细胞阳性率相比有统计学意义（p<0.05）。