目的:通过检测SD大鼠实验性隐睾分化型A型精原细胞c-kit和PI3K(P110α)的mRNA及蛋白的表达以及分化型A型精原细胞细胞周期的变化,初探温度变化对分化型A型精原细胞SCF/c-kit通路中c-kit基因及下游信号PI3K (P110α)及细胞周期的影响。方法:以SD雄性育龄期大鼠作为实验动物,分为正常对照组(不作任何处理)和实验组(双侧腹腔隐睾模型)。在建模后1-3周末,在各时点分别采用SP免疫组化法观察体腔温度作用于睾丸分化型A型精原细胞的影响情况,应用逆转录-多聚酶链反应(Reverse transcription Polymerase chain reaction, RT-PCR)技术和蛋白电泳(Western blot)检测各时点分化型A型精原细胞c-kit和PI3K (P110α)的mRNA及蛋白表达水平;用流式细胞仪(Flow Cytometry, FCM)检测各时点分化型A型精原细胞的细胞周期。结果:免疫组化显示:C-kit在正常生精小管近基膜的分化型精原细胞呈强阳性,染成呈棕黄色;其他细胞(精母细胞、精子顶体)呈弱阳性或阴性,染成呈浅黄色或不着色。不加一抗的空白对照组细胞均呈阴性,不着色。实验组随着时间的延长生精细胞越来越少,最后变成单层精原细胞,精原细胞呈强阳性,染成呈棕黄色,曲细精管管壁变薄弯曲皱缩,管腔变大,间质变少。RT-PCR和Western blot结果显示:1.实验组c-kit的mRNA及蛋白在第一周中高表达,随着时间延长呈降低趋势,但均高于正常对照组;实验组c-kit mRNA在第一、二、三周组分别和正常组比较有统计学差异性(P<0.05);第一周与二、三周相比均有统计学差异性(P<0.05),第二周与三周组比较无统计学差异性(P>0.05);c-kit蛋白在第一、二周分别和正常对照组比较有统计学差异性(P<0.05);第一、二、三周组内比较均有统计学差异性(P<0.05),第三周和正常对照组比较无统计学差异性(P>0.05);2.实验组PI3K (P110α)的mRNA及蛋白在第一周中高表达,随着时间延长呈降低趋势,实验组PI3K (P110α) mRNA在第一、二、三周组分别和正常对照组比较有统计学差异性(P<0.05);第一、二、三周组内比较均有统计学差异性(P<0.05); PI3K (P110α)蛋白表达:正常对照组分别与一周组、二周组比较有统计学意义(P<0.05);第一周、二周、三周组组内相互比较均有统计学差异性(P<0.05)。第三周组与正常对照组比较无统计学差异性(P>0.05)。细胞周期结果:实验组G0/G1、S期、G2/M期与正常对照组G0/G1、S期、G2/M期相比较均无统计学差异性(P>0.05),S期、G2/M期所占比例随时间延长无上升趋势。结论:SCF/c-kit及下游信号PI3KP (P110α)增殖系统增殖信号增强,说明温度升高引起生精障碍可能不是通过SCF/C-KIT增殖通路引起的。