经鼻小剂量rhEPO对脑缺血大鼠脑内基质金属蛋白酶-9、小窝蛋白-1表达的影响

目的:1：观察经鼻内给脑缺血大鼠小剂量重组人促红细胞生成素（rhEPO），其对脑缺血大鼠是否具有脑保护作用，从而进一步验证鼻内给药方式的可行性。2：观察rhEPO对急性脑缺血大鼠脑内基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、小窝蛋白-1（cavolin-1Cav-1）表达的影响，探讨rhEPO的神经保护机制，为临床上应用rhEPO提供实验依据。方法:90只健康雄性SD大鼠随机分为3组，即假手术组、缺血组和rhEPO治疗组。参照改良的Zea-Longa等的线栓法制作大鼠永久性局灶性脑缺血（pMCAO)模型:rhEPO治疗组在大鼠脑缺血1小时后经鼻内给予重组人促红细胞生成素（48UrhEPO用PBS稀释至50μL），缺血组和假手术组在等时间点给予等体积的生理盐水（50μL生理盐水），分别对大鼠进行行为学评分，24小时后断头取出完整的脑组织，干湿质量法测脑组织含水量，伊文思蓝（EB）法测血脑屏障的通透性，2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）法测量脑梗死体积，免疫组织化学方法测定MMP-9、CAV-1蛋白的表达。结果:1：脑缺血缺氧后，大鼠的脑含水量和EB含量增加，脑梗死面积大，与缺血组相比，脑缺血1h后经鼻给小剂量rhEPO治疗组显示，脑含水量、EB含量明显减少，梗死面积明显减小，差别有统计学意义。2：免疫组化测定MMP-9、CAV-1蛋白的表达：假手术组MMP-9仅见微弱表达，缺血组可见大量的表达，rhEPO治疗组与缺血组相比，阳性细胞数表达明显下降；缺血缺氧后，CAV-1的表达增加，本实验中假手术组可见微量阳性细胞表达，缺血组表达增加，但与缺血组相比，rhEPO治疗组可见较多阳性细胞表达。结论:1：鼻内给rhEPO是一种有效地给药途径:2：rhEPO通过降低MMP-9蛋白的表达对急性脑缺血大鼠脑组织损伤发挥保护作用:3：脑组织Cav-1表达的增高可能对急性脑缺血大鼠脑组织发挥一定的积极作用。