土壤干旱胁迫下4种不同基因型小麦脱水素蛋白表达的研究

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自然界中不良的生长环境会对植物的生长和发育产生有害的影响,严重时还会导致植物的死亡。干旱是最常见的逆境之一,也是限制农业生产的一个重要的环境因素。小麦(Triticum aestivum L.)是世界上最重要的粮食作物,每年由于干旱造成大量的减产,对人类的生存产生很大的影响。因此,国内外对小麦的抗旱研究都投入很大的力度,旨在解决这个限制农业生产的“瓶颈”问题,提高粮食的产量与质量,提高国民生活的水平。脱水素是植物在逆境胁迫下表达的一类蛋白质,它在植物应答逆境胁迫时有着很重要的作用。目前,国内外对脱水素的结构、定位、功能以及基因表达调控的研究都有很大的进展,但是对于小麦中脱水素的研究较少,而且,许多研究都是采取短期胁迫实验,实际应用意义有限。鉴于此,本研究通过4种耐旱性不同的小麦在不同的发育时期内、不同的干旱胁迫程度下脱水素的表达规律,旨在找出脱水素的表达与品种、发育期、胁迫程度的关系,为探究脱水素在小麦干旱胁迫应答中的作用以及它的抗旱机制研究提供理论依据,这对小麦的转基因分子育种和改良作物抗旱性有着很重要的意义。实验以4种耐旱性不同小麦为材料(干旱敏感型小麦:郑引1#和低抗7532;干旱耐受型小麦:陕合6#和高抗86211),通过土壤盆栽自然干旱胁迫和复水条件下处理小麦,采用SDS-PAGE和Western blot方法,研究小麦生长的4个关键期:苗期、分蘖期、拔节期、开花期的不同程度干旱胁迫下,脱水素(Dehydrin)表达的规律。获得以下结果:(1)4种不同基因型小麦在土壤干旱条件下均可以诱导脱水素的表达,并且在复水后表达都会下降,表明这几种脱水素与干旱胁迫密切相关。(2)4种基因型小麦中表达的脱水素,有些是有品种特异性的,有些却在这四种小麦中都表达。45KDa、37KDa脱水素在4种小麦中都有表达,49KDa脱水素只在高抗中表达,40KDa脱水素只在低抗中表达。(3)在同等土壤干旱程度下脱水素在一种小麦的不同生育期表达不同。不同发育期内干旱胁迫都可以表达45KDa、37KDa脱水素,28KDa脱水素在各个小麦品种的特定发育时期表达。(4)干旱耐受型小麦和干旱敏感型小麦表达的脱水素有差异,表现在随着干旱胁迫程度加剧和复水,脱水素的表达量和表达规律都有差异。干旱耐受型的小麦在相同的胁迫水平下表达的脱水素较干旱敏感型的多,前者的脱水素对重度干旱胁迫敏感,干旱复水恢复能力强,后者的脱水素对干旱胁迫敏感,大量表达的较前者早,而且干旱复水恢复能力弱。脱水素在耐旱性不同的小麦中表达的具体的规律是:在干旱耐受型的小麦中是胁迫初期开始少量表达,随着胁迫程度加剧,表达量急剧增加,在重度干旱胁迫下表达量达到峰值,小麦叶片中脱水素的量迅速下降;在干旱敏感型的小麦中是胁迫初期开始大量表达,随着胁迫程度增加,表达量会有一个小幅度的回落,此后会逐渐小幅度增加,在复水第1d表达量并没有下降,而是达到峰值,此后随着复水时间增加,小麦叶片中脱水素的量逐渐下降。
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 综述第12-35页
    1.1 植物的抗性生理第13-15页
        1.1.1 逆境的概念和种类第13-14页
        1.1.2 植物抗性与种类第14-15页
    1.2 植物的抗旱生理第15-26页
        1.2.1 干旱的概念及类型第15-16页
        1.2.2 干旱对植物的损伤第16-18页
        1.2.3 植物的抗旱机理第18-24页
        1.2.4 提高植物抗旱性的途径第24-26页
    1.3 LEA 蛋白与干旱胁迫第26-29页
    1.4 脱水素与干旱胁迫第29-33页
        1.4.1 脱水素的结构与分类第29-31页
        1.4.2 脱水素的定位第31-32页
        1.4.3 脱水素的功能第32-33页
    1.5 本研究的目的和意义第33-35页
第二章 干旱胁迫对不同发育期不同基因型小麦叶片脱水素表达的影响第35-51页
    2.1 实验材料与试剂第35-37页
        2.1.1 实验材料第35页
        2.1.2 实验主要试剂第35-36页
        2.1.3 实验主要仪器及设备第36-37页
    2.2 研究方法第37-39页
        2.2.1 小麦培养与胁迫处理第37页
        2.2.2 小麦叶片可溶性蛋白质的提取第37页
        2.2.3 蛋白质定量第37-38页
        2.2.4 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳第38页
        2.2.5 Western Blot 分析第38-39页
    2.3 结果与分析第39-51页
        2.3.1 干旱胁迫对不同发育时期的高抗86211 小麦叶片脱水素表达的影响第39-42页
        2.3.2 干旱胁迫对不同发育时期的陕合6第42-45页
        2.3.3 干旱胁迫对不同发育时期的低抗7532 小麦叶片脱水素表达的影响第45-47页
        2.3.4 干旱胁迫对不同发育时期的郑引1第47-51页
第三章 分析与讨论第51-54页
第四章 结论与展望第54-56页
    4.1 结论第54页
    4.2 展望第54-56页
参考文献第56-68页
附录第68-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页
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