艾灸预处理诱导大鼠胃粘膜热休克蛋白70高表达抗应激损伤作用的实验研究
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目的:观察艾灸足三里、梁门穴预处理对应激性溃疡(stress-induced ulcer,SU)大鼠胃粘膜损伤的影响、并与非穴组效应进行比较,证实艾灸是否通过诱导热休克蛋白70(Heat Shock Protein 70)高表达而对胃粘膜产生保护作用、是否有穴位特异性,从分子水平上进一步阐明针灸保护胃粘膜的内在机制及足阳明经与胃的密切联系,为经脉脏腑相关理论、针灸临床选穴提供实验依据。方法:将60只健康SD大鼠(雌雄各半)完全随机分为4组:空白组、模型组、足三里、梁门穴组和非穴组,每组15只。用束缚冷应激法制作应激性溃疡模型。采用Guth法计数胃粘膜损伤指数(Ulcer Index UI),生物信号分析仪检测胃粘膜血流量(Gastric Mucosa Blood Flux GMBF),免疫组织化学和逆转录聚合酶链式反应法检测胃粘膜HSP70的蛋白及基因表达(HSP70mRNA),硫代巴比妥法检测胃粘膜丙二醛(Malondialdehydein MDA)含量,放射免疫法测定胃粘膜内皮素(Endothelin ET)、前列腺素E2 (Prostaglandin E2PGE2)的含量。结果:1、与空白组比较,模型组大鼠胃粘膜UI升高、胃粘膜HSP70表达增强、GMBF和PGE2含量下降、胃粘膜MDA和ET含量升高,并有显著性差异(P<0.01或0.05)。2、与模型组比较,足三里、梁门穴组大鼠胃粘膜UI降低、胃粘膜HSP70表达增强、GMBF和PGE2含量增加、胃粘膜MDA和ET含量下降,并有显著性差异(P<0.01或0.05)。3、除胃粘膜ET含量外,足三里、梁门穴组大鼠的其余各项指标与非穴组比较均有显著性差异(P<0.01或0.05)。结论:艾灸足三里、梁门穴预处理对胃粘膜有一定的预保护作用,其机制主要体现在通过诱导胃粘膜HSP70和HSP70mRNA高表达而增加GMBF、促进胃粘膜保护性物质PGE2的释放、抑制胃粘膜损伤因子ET和MDA的释放等方面,并有穴位特异性。
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
前言 | 第11-13页 |
材料与方法 | 第13-21页 |
1.实验材料 | 第13-15页 |
1.1 实验动物 | 第13页 |
1.2 施灸材料 | 第13页 |
1.3 仪器及试剂 | 第13-15页 |
2.实验方法 | 第15-21页 |
2.1 动物分组与造模 | 第15页 |
2.2 处理步骤 | 第15-16页 |
2.2.1 穴位定位 | 第15页 |
2.2.2 艾灸 | 第15-16页 |
2.2.3 造模 | 第16页 |
2.3 标本采集 | 第16页 |
2.3.1 免疫组化标本 | 第16页 |
2.3.2 胃粘膜 | 第16页 |
2.4 指标检测 | 第16-19页 |
2.4.1 UI的检测方法 | 第16-17页 |
2.4.2 GMBF的检测方法 | 第17页 |
2.4.3 胃粘膜HSP70的检测方法 | 第17-18页 |
2.4.4 胃粘膜HSP70mRNA | 第18-19页 |
2.4.5 胃粘膜ET和PGE_2含量测定方法 | 第19页 |
2.4.6 胃粘膜MDA含量测定方法 | 第19页 |
2.5 统计方法 | 第19-21页 |
结果与分析 | 第21-29页 |
1.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜UI的影响 | 第21-22页 |
2.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜HSP70mRNA表达的影响 | 第22-23页 |
3.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜HSP70的影响 | 第23-24页 |
4.艾灸预处理对SU大鼠GMBF的影响 | 第24-25页 |
5.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜PGE_2含量的比较 | 第25-26页 |
6.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜ET含量的影响 | 第26-27页 |
7.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜MDA含量的影响 | 第27-29页 |
讨论 | 第29-48页 |
1.SU的发生机制 | 第29-30页 |
2.HSPs的现代研究 | 第30-33页 |
2.1 HSPs的概念和产生 | 第30-31页 |
2.2 HSPs的分类和作用 | 第31-32页 |
2.3 HSPs与应激 | 第32-33页 |
3.针灸诱导HSPs的实验研究 | 第33页 |
4.艾灸对SU大鼠胃粘膜的预保护作用 | 第33-41页 |
4.1 艾灸的作用 | 第33-37页 |
4.1.1 艾灸与"治未病" | 第33-36页 |
4.1.2 现代医学对艾灸的认识 | 第36-37页 |
4.2 经络腧穴作用 | 第37-40页 |
4.2.1 经脉脏腑相关理论 | 第37-39页 |
4.2.2 足三里和梁门 | 第39-40页 |
4.3 艾灸与经络腧穴的有机结合产生了艾灸的"综合效应" | 第40-41页 |
5.艾灸预处理对SU大鼠胃粘膜保护效应的分析 | 第41-48页 |
5.1 对SU大鼠胃粘膜HSP70蛋白和基因表达的影响 | 第41-43页 |
5.2 对SU大鼠胃粘膜损伤机制的影响 | 第43-45页 |
5.3 对SU大鼠胃粘膜保护机制的影响 | 第45-48页 |
结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附图 | 第55-59页 |
附录1 攻读硕士学位期间论文发表及科研题录 | 第59-60页 |
附录2 文献综述 | 第60-63页 |
附件 | 第63-64页 |
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