中文摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
一、前言 | 第9-31页 |
1.1 骨骼形态发生蛋白受体(BMPR)的研究进展 | 第9-14页 |
1.1.1 BMPR | 第9-10页 |
1.1.2 BMPR的信号传递机制 | 第10-11页 |
1.1.3 BMPR的功能 | 第11-12页 |
1.1.4 BMPR-IB基因 | 第12-14页 |
1.2 山羊繁殖性状基因 | 第14-16页 |
1.3 绵羊和山羊繁殖性状基因多态性研究 | 第16-25页 |
1.3.1 RFLP标记 | 第16-17页 |
1.3.2 RAPD标记 | 第17-18页 |
1.3.3 AFLP标记 | 第18-19页 |
1.3.4 微卫星标记 | 第19-21页 |
1.3.5 SSCP标记 | 第21-22页 |
1.3.6 SNP标记 | 第22-24页 |
1.3.7 Tetra-ARMS(tetra-primer amplification refractory mutation system PCR)标记 | 第24-25页 |
1.4 贵州白山羊 | 第25-31页 |
1.4.1 产地和分布 | 第25-26页 |
1.4.2 特征和特性 | 第26-29页 |
1.4.3 生产和应用 | 第29-31页 |
二、论文研究的目的和意义 | 第31-32页 |
三、实验材料与方法 | 第32-49页 |
3.1 实验材料 | 第32-35页 |
3.1.1 实验动物及血样 | 第32页 |
3.1.2 实验仪器和试剂 | 第32-35页 |
3.2 引物的设计和合成 | 第35-36页 |
3.3 实验方法 | 第36-47页 |
3.3.1 血液基因组DNA的提取(E.Z.N.A.SQ Blood DNA Kit) | 第36页 |
3.3.2 目的基因的扩增 | 第36-37页 |
3.3.3 PCR产物的检测 | 第37-38页 |
3.3.4 BMPR-IB基因外显子6的PCR-RFLP分析 | 第38-39页 |
3.3.5 PCR扩增产物的PCR-SSCP分析及基因型判定 | 第39-40页 |
3.3.6 Tetra-ARMS PCR检测BMPR-IB基因第6外显子 | 第40-43页 |
3.3.7 胶回收 | 第43-44页 |
3.3.8 DNA和载体酶切 | 第44页 |
3.3.9 DNA的连接 | 第44页 |
3.3.10 感受态细胞的制备及转化 | 第44-46页 |
3.3.11 阳性菌落的筛选与鉴定 | 第46-47页 |
3.4 碱基序列的测定 | 第47-48页 |
3.5 分析软件 | 第48-49页 |
四、结果 | 第49-55页 |
4.1 BMPR-IB基因PCR的扩增 | 第49-52页 |
4.1.1 BMPR-IB基因外显子6 DNA片段的扩增 | 第49页 |
4.1.2 BMPR-IB基因外显子5 PCR产物的扩增结果 | 第49-50页 |
4.1.3 BMPR-IB基因外显子7 PCR产物的扩增结果 | 第50页 |
4.1.4 BMPR-IB基因外显子8 PCR产物的扩增结果 | 第50-51页 |
4.1.5 BMPR-IB基因外显子9 PCR产物的扩增 | 第51页 |
4.1.6 BMPR-IB基因外显子10 PCR产物的扩增结果 | 第51-52页 |
4.2 BMPR-IB基因外显子6的PCR-RFLP检测 | 第52页 |
4.3 四引物ARMS-PCR的检测结果 | 第52-53页 |
4.4 BMPR-IB基因PCR-SSCP多态性检测结果 | 第53-55页 |
4.4.1 SSCP检测结果基因型命名 | 第53页 |
4.4.2 BMPR-IB基因外显子6的PCR-SSCP检测结果 | 第53页 |
4.4.3 BMPR-IB基因外显子5的PCR-SSCP检测结果 | 第53页 |
4.4.4 BMPR-IB基因外显子7的PCR-SSCP检测结果 | 第53-54页 |
4.4.5 BMPR-IB基因外显子8的PCR-SSCP检测结果 | 第54页 |
4.4.6 BMPR-IB基因外显子9的PCR-SSCP检测结果 | 第54页 |
4.4.7 BMPR-IB基因外显子10的PCR-SSCP检测结果 | 第54-55页 |
五、讨论 | 第55-60页 |
5.1 关于贵州白山羊BMPR-IB基因外显子6的多态性检测结果 | 第55-56页 |
5.2 关于贵州白山羊BMPR-IB基因外显子5、外显子7至外显子10的多态性检测结果 | 第56页 |
5.3 影响PCR-SSCP检测的因素 | 第56-60页 |
5.3.1 PCR产物的质量 | 第57页 |
5.3.2 DNA片段中点突变的位置对SSCP的影响 | 第57页 |
5.3.3 非变性聚丙烯酰胺凝胶成分 | 第57-58页 |
5.3.4 上样缓冲液与变性 | 第58页 |
5.3.5 电泳条件 | 第58页 |
5.3.6 其它因素 | 第58-60页 |
六、小结 | 第60-61页 |
七、参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-68页 |
缩略语表 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-71页 |