为探讨应激条件下肉仔鸡能量食欲调控的机制,本研究从应激发展的两个阶段——急性,长期过程着手,利用人工导入外源糖皮质激素的方法模拟应激,分别分析了下丘脑代谢变化和相关基因表达量的改变,为建立应激状态下下丘脑能量食欲调控模式,以改善生产中应激引起的能量浪费提供依据。第一部分中,试验一包括三个类似的小试验,处理基本一致。Trial 1选取体重相近的Arbor Acres(AA)雄性肉鸡64只,随机分为四个组:应激及日粮自由选择组(DEX,高,低能日粮,n=8),对照组(生理盐水,高,低能日粮,n=8),高能日粮组(代谢能,15.1KJ/Kg;粗蛋白,20%)(n=8),低能日粮组(代谢能,10.9KJ/Kg;粗蛋白,20%)(n=8),单笼饲养,每个笼均设红绿两个饲槽。Trial 2选取体重相近的AA雄性肉鸡96只,在trial 1的基础上多加两个饲槽无颜色处理组(DEX,高,低能日粮;对照组);Trial 3选取选取体重相近的AA雄性肉鸡32只,随机分为两组,处理同trial 2中饲槽无颜色处理组。每个试验5日龄起每日早8:00,应激组以2.6mg/kg体重的剂量注射DEX,对照及高低能日粮组均注射相应剂量的生理盐水。每日统计采食量。10日龄早8:00采血。试验结果表明,本试验成功引发应激,应激组对高能日粮的采食显著升高,提示应激改变了肉鸡对日粮能量的采食偏好;饲槽颜色对肉仔鸡采食量无显著影响。试验二选取体重相近的AA雄性肉鸡96只,随机分为六个处理组:应激及高能日粮组(DEX,高能日粮),高能日粮对照组(生理盐水,高能日粮),应激低能日粮组(DEX,低能日粮),低能日粮对照组(生理盐水,低能日粮),应激及日粮自由选择组(DEX,高,低能日粮),日粮自由选择对照组(生理盐水,高,低能日粮)。每组8个重复,每个重复两只鸡,单笼饲养。应激处理及采食量统计同试验一,10日龄早8:00采样。试验鸡心脏采血,断头后于30s内取出下丘脑,液氮速冻。试验结果表明:应激显著降低了肉仔鸡生产性能,高能日粮能缓解应激对采食的影响;应激及日粮能量水平对下丘脑葡萄糖含量没有显著影响;下丘脑各采食调控基因mRNA水平的变化提示肉仔鸡在长期应激状态下,通过对能量摄入量的控制,维持了下丘脑采食调控的平衡。试验三分为两个小试验,trial 1将体重相近的AA雄性肉仔鸡80只,随机分为两个处理组:应激组,对照组。试验在单饲笼内进行,每组设10个重复,每个重复4只鸡。11日龄起每天06:0(0空腹3h),应激组按2.6 mg/kg BW的剂量皮下注射DEX,对照组同剂量皮下注射生理盐水,连续注射三天,13日龄的08:00(应激2h,空腹5h)和09:00(应激3h,恢复采食1h)两个时间点分别采样(血浆,下丘脑)。Trial 2分组同trial 1,11日龄起注射时间为每天10:00(空腹1h), 13日龄的12:00(应激2h,空腹3h)采样,样品采集同trial 1。试验主要结果显示:禁食状态下,应激显著升高了肉仔鸡下丘脑NPY,AgRP的表达量,这两个基因水平的上调随着采食的恢复消失。第二部分中,试验一选取体重相近的AA肉仔鸡32只随机分为四组,早6:00禁食3h后,以2.6mg/kgBW剂量注射DEX,同时灌注色氨酸(生理盐水溶解,500mg/kgBW),两个处理分别设一个生理盐水对照组,3h后取血浆及下丘脑。下丘脑用高氯酸萃取后进行NMR研究。通过1H NMR谱,发现应激改变了肉鸡下丘脑乳酸,葡萄糖,ATP,肌醇,3-羟基丁酸的相对含量;未检测到色氨酸信号的改变。试验二选取体重相近的AA肉仔鸡32只,随机分为四个组。早6:30禁食,3小时后A、B组按2.6mg/kg体重注射DEX,饲喂高能日粮。C、D组注射相应剂量的生理盐水,饲喂低能日粮。11:30所有试验鸡心脏采血。取下丘脑液氮速冻。试验结果显示:皮下注射地塞米松成功引发肉仔鸡急性应激;对下丘脑采食调控基因的检测结果主要提示,急性应激可能通过上调下丘脑NPY的表达量导致肉仔鸡短期内的采食量的升高。
