蝙蝠蛾拟青霉菌丝体促进脂肪细胞脂肮分解并抑制肝细胞脂肪变性的作用机制研究

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摘要第6-9页
ABSTRACT第9-11页
1 绪论第16-28页
    1.1 冬虫夏草及其研究现状第16-19页
        1.1.1 冬虫夏草的无性型研究第16-18页
        1.1.2 蝙蝠蛾拟青霉的活性及利用现状第18-19页
    1.2 脂肪细胞概况及脂肪代谢相关通路第19-25页
        1.2.1 脂肪细胞概况第19-23页
        1.2.2 成熟脂肪细胞脂肪分解的相关机制第23-25页
    1.3 非酒精性脂肪肝及其重要调节机制第25-26页
    1.4 本课题的研究目的和意义第26-28页
2 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体甲醇提取物中主要成分的含量测定第28-48页
    2.1 实验材料第28-29页
        2.1.1 药品和试剂第28页
        2.1.2 仪器第28页
        2.1.3 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体甲醇提取物(PHME)的制备第28-29页
    2.2 实验方法第29-32页
        2.2.1 总糖和还原糖的测定第29页
        2.2.2 甘露醇测定第29-30页
        2.2.3 核苷类的测定第30-31页
        2.2.4 数据处理第31-32页
    2.3 结果与分析第32-46页
        2.3.1 PHME中糖类的含量第32-33页
        2.3.2 PHME中甘露醇的含量第33-34页
        2.3.3 PHME中核苷类的含量第34-46页
    2.4 讨论第46-48页
3 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体甲醇提取物及其单体对3T3-L1脂肪细胞脂肪分解的调节及作用机制第48-78页
    3.1 前言第48页
    3.2 实验材料第48-50页
        3.2.1 药品和试剂第48-49页
        3.2.2 仪器第49-50页
        3.2.3 细胞株第50页
    3.3 实验方法第50-57页
        3.3.1 相关试剂配制第50-52页
        3.3.2 药物配制第52页
        3.3.3 3T3-L1前脂肪细胞的培养及诱导分化第52页
        3.3.4 MTT实验第52-53页
        3.3.5 油红O染色第53页
        3.3.6 甘油含量测定第53页
        3.3.7 RNA的抽提与反转录第53-55页
        3.3.8 实时荧光定量PCR实验第55页
        3.3.9 蛋白质免疫印迹实验第55-56页
        3.3.10 统计学分析第56-57页
    3.4 结果与讨论第57-76页
        3.4.1 PHME单独处理以及分别与毛喉素和异丙肾上腺素联用时对3 T3-L1成熟脂肪细胞存活率的影响第57-58页
        3.4.2 PHME单独处理以及分别与毛喉素和异丙肾上腺素联用时对3 T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解的影响第58-61页
        3.4.3 PHME对3T3-L1成熟脂肪细胞脂解相关酶系及转录因子的mRNA表达的影响第61-62页
        3.4.4 PHME促进3T3-L1成熟脂肪细胞HSL和ERK1/2蛋白的磷酸化第62-64页
        3.4.5 PHME通过激活cAMP-PKA信号通路促进3T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解第64-66页
        3.4.6 PHME通过激活ERK-Perilipin信号通路促进3T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解第66-68页
        3.4.7 腺苷、鸟苷、尿苷、甘露醇和虫草素对3T3-L1成熟脂肪细胞存活率的影响第68-69页
        3.4.8 腺苷、鸟苷、尿苷、甘露醇和虫草素对3T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解的影响第69-71页
        3.4.9 虫草素分别与异丙肾上腺素和毛喉素联用对3T3-L1成熟脂肪细胞存活率的影响第71-72页
        3.4.10 虫草素分别与异丙肾上腺素和毛喉素联用对3T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解的影响第72-73页
        3.4.11 虫草素对3T3-L1成熟脂肪细胞脂解相关酶系及转录因子的mRNA表达的影响第73-74页
        3.4.12 虫草素下调成熟脂肪细胞Perilipin和PPARy蛋白的表达水平第74-76页
    3.5 本章小结第76-78页
4 蝙蝠蛾拟青霉菌丝体甲醇提取物和虫草素对油酸钠诱导的HL7702肝细胞脂肪变性的抑制作用第78-93页
    4.1 前言第78-79页
    4.2 实验材料第79-81页
        4.2.1 药品和试剂第79-80页
        4.2.2 仪器第80页
        4.2.3 细胞株第80-81页
    4.3 实验方法第81-83页
        4.3.1 相关试剂配制第81页
        4.3.2 药物配制第81页
        4.3.3 HL7702肝细胞培养以及脂肪变性模型诱导方法第81-82页
        4.3.4 MTT实验第82页
        4.3.5 油红O染色第82页
        4.3.6 甘油含量测定第82页
        4.3.7 RNA的抽提与反转录第82页
        4.3.8 实时荧光定量PCR实验第82页
        4.3.9 蛋白质免疫印迹实验第82页
        4.3.10 统计学分析第82-83页
    4.4 结果与讨论第83-91页
        4.4.1 虫草素对HL7702细胞存活率的影响第83-84页
        4.4.2 虫草素抑制油酸钠诱导的HL7702细胞脂肪变性第84-85页
        4.4.3 虫草素对油酸钠诱导的HL7702细胞脂肪变性过程中相关转录因子表达的影响第85-86页
        4.4.4 虫草素对油酸钠诱导的HL7702细胞脂肪变性过程中能量相关蛋白表达的影响第86-87页
        4.4.5 PHME对HL7702细胞存活率的影响第87-88页
        4.4.6 PHME抑制油酸钠诱导的HL7702细胞脂肪变性第88-89页
        4.4.7 PHME对油酸钠诱导的HL7702细胞脂肪变性过程中相关转录因子表达的影响第89-90页
        4.4.8 PHME对油酸钠诱导的HL7702细胞脂肪变性过程中能量相关蛋白表达的影响第90-91页
    4.5 结果与讨论第91-93页
5 全文总结第93-96页
    5.1 研究内容和发现第93页
    5.2 创新点第93-94页
    5.3 展望第94-96页
参考文献第96-112页
附录Ⅰ 缩略词对照表第112-115页
附录Ⅱ 引物序列第115-116页
附录Ⅲ 硕士期间学术成果第116-117页
致谢第117-118页
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