Apocynin改善糖尿病大鼠勃起功能及其机制的研究

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第一部分Apocynin对糖尿病ED大鼠的勃起功能的作用[目的]探讨Apocynin对糖尿病ED大鼠的勃起功能的作用。[方法]20只年龄45天的SD雄性大鼠随机分为3组,正常对照组大鼠7只,其他13只大鼠用于糖尿病ED大鼠模型的构造,给予腹腔一次性注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)60mg/Kg的柠檬酸钠缓冲液(50mmol/L,PH=4.5),注射72小时后,利用血糖仪检测大鼠的血糖值,随机血糖高于16.7mmol/L被认为糖尿病大鼠造模成功,所有大鼠均造模成功。8周后,随机选取7只大鼠灌胃给予Apocynin (16mg/Kg),另外6只糖尿病大鼠及正常对照组大鼠给予生理盐水灌胃,持续4周。4周后,通过电刺激阴茎海绵体神经诱导阴茎勃起,同时记录大鼠的平均动脉压(Mean arterial blood pressure, MAP)及海绵体压力(Intracavernosal Pressure, ICP), ICP/MAP的比值即反应大鼠的勃起功能。[结果]糖尿病ED大鼠的勃起功能明显的低于正常对照组(P<0.05),给予Apocynin组糖尿病ED大鼠勃起功能明显高于糖尿病ED组(P<0.05)。[结论]Apocynin能够改善糖尿病ED大鼠的勃起功能。第二部分Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中NADPH氧化酶的抑制作用[目的]探讨Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中NADPH氧化酶的抑制作用。[方法]通过蛋白质印迹(Western Blot, WB)技术检测各组大鼠阴茎海绵体组织中NADPH氧化酶亚基p47phox和p67phox蛋白表达的情况。应用二氢吡啶(dihydropyridine,DHE)荧光探针定性检测大鼠阴茎海绵体组织中总的活性氧表达情况。应用硫代巴比妥酸反应物(Thiobarbituric Acid Reactive Substances, TBARS)法检测脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde, MDA)的表达多少来确定ROS的多少。[结果]糖尿病ED大鼠阴茎组织中p47phox和p67phox蛋白表达、ROS及MDA的表达明显的高于正常对照组(P<0.05),给予Apocynin组糖尿病ED大鼠阴茎组织中P47phox和p67phox蛋白表达、ROS及MDA的表达明显的低于糖尿病ED组(P<0.05)。[结论]Apocynin能够通过抑制NADPH氧化酶明显的减少ROS的产生。第三部分Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中nNOS及eNOS表达的作用[目的]探讨Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中nNOS及eNOS表达的作用。[方法]通过实时荧光聚合酶链反应(Real-time Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)技术,WB技术检测各组大鼠阴茎海绵体组织中nNOS及eNOS基因及蛋白表达的情况。结果:糖尿病ED大鼠阴茎组织中nNOS及eNOS的基因表达及蛋白表达明显的低于正常对照组(P<0.05),给予Apocynin组糖尿病ED大鼠阴茎组织中nNOS及eNOS的基因表达及蛋白表达明显的高于糖尿病ED组(P<0.05)。[结论]Apocynin能够明显改善糖尿病ED大鼠阴茎海绵体组织中nNOS及eNOS的表达。第四部分Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中RhoA/ROCK途径的抑制作用【目的】探讨Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中RhoA/ROCK信号途径的抑制作用。【方法】通过RT-PCR技术,WB技术检测各组大鼠阴茎海绵体组织中RhoA、ROCKl和ROCK2基因的表达情况,以及磷酸化肌球蛋白轻链磷酸酶(Phosphonation-myosinlight chain phosphatase, p-MYPTl),细胞膜RhoA,细胞质RhoA, ROCKl和ROCK2蛋白的表达情况。【结果】糖尿病ED大鼠阴茎组织中ROCK1的基因及蛋白、p-MYPTl蛋白的表达明显的高于正常对照组(/?<0.05), RhoA, ROCK2与正常对照组及糖尿病大鼠给予Apocynin组没有明显的差别。给予Apocynin组糖尿病ED大鼠阴茎组织中ROCK1的基因及蛋白表达、p-MYPTl蛋白的表达明显的低于糖尿病ED组(/?<0.05)。【结论】Apocynin可以抑制糖尿病ED大鼠阴茎组织中RhoA/ROCK信号途径。
中英文縮略词表第5-7页
研究背景第7-9页
中文摘要第9-13页
Abstract第13-17页
前言第18-24页
    参考文献第21-24页
第一部分 Apocynin对糖尿病ED大鼠的勃起功能的改善作用第24-29页
    材料与方法第24-27页
    结果第27-29页
第二部分 Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中NADPH氧化酶的抑制作用第29-37页
    材料和方法第29-34页
    结果第34-37页
第三部分 Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中nNOS及eNOS表达的作用第37-46页
    材料与方法第37-44页
    结果第44-46页
第四部分 Apocynin对糖尿病大鼠阴茎组织中RhoA/Rho激酶途径的抑制作用第46-57页
    材料和方法第46-54页
    结果第54-57页
讨论第57-61页
参考文献第61-64页
综述一第64-73页
    参考文献第70-73页
综述二第73-85页
    参考文献第80-85页
综述三第85-98页
    参考文献第93-98页
附录第98-100页
致谢第100页
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