配偶选择对黑线仓鼠脑内DADR2表达的影响
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作为世界上的农业大国之一,我国一直饱受鼠害对农业生产的巨大影响。进入21世纪以来,鼠害防治的研究更多的倾向于从微观层面揭示农田害鼠的高种群密度及高繁殖力的问题。黑线仓鼠是我国北方农田的主要害鼠之一,其高繁殖力是其种群数量居高不下的主要原因之一。而婚配制度通过影响繁殖力进而能够影响种群数量,也成为研究的热点之一。社会行为是动物行为生态学的基本内容之一,包括种群内的个体之间的相遇及相遇以后的一系列活动。动物的社会行为受神经系统支配。已有研究表明,多巴胺作为中枢神经系统中主要的神经递质之一,可以通过激活其多巴胺D2受体来调控雌雄配偶选择。本研究旨在探究黑线仓鼠在配偶选择中的各种社会行为学参数与脑内多巴胺D2受体表达量的关系。实验在室内控制条件下,将实验鼠分为两组,即异地组与同胞组,建立不同的配对关系,再对不同配对关系下雌雄鼠的行为学参数进行统计分析;同时采用实时荧光定量PCR方法,对其脑内多巴胺D2受体表达量进行相对定量,研究两者之间的关系,试图从宏观与微观两个层面揭示黑线仓鼠的婚配机制,以期为我国鼠害防治问题提供分子层面上的理论依据,为我国农业生产做出贡献。行为学实验结果显示,在不同配对关系下,雌雄黑线仓鼠的各种行为存在显著差异。首先,两组雄性黑线仓鼠在自我修饰频次与嗅闻频次上差异极显著(P<0.01),在攻击追逐行为与防御躲避行为上差异较显著(P<0.05);其次,两组雌性黑线仓鼠在自我修饰频次上差异较显著(P<0.05),在攻击追逐行为上差异极显著(P<0.01),在防御躲避行为上差异不显著;第三,雌雄在直立频次与环境探究方面差异均不显著。在不同配对关系下,对雌雄黑线仓鼠的行为频次与其脑内多巴胺D2受体表达量进行相关分析,结果显示:同胞组雄性黑线仓鼠的自我修饰频次和环境探究行为与其脑内多巴胺D2受体(DRD2)mRNA表达量之间呈显著正相关(P<0.05),其攻击行为与脑内多巴胺D2受体mRNA表达量之间呈显著负相关(P<0.05),其余行为与脑内多巴胺D2受体mRNA表达量之间的相关性均不显著;同胞组雌性黑线仓鼠只有环境探究行为与脑内DRD2mRNA表达量之间呈显著负相关(P<0.05),其余行为与脑内DRD2mRNA表达量之间的相关性均不显著。以上研究结果表明,不同的配对关系对雌雄黑线仓鼠的社会行为以及脑内多巴胺D2受体表达量均产生了影响。不同的配对关系即是婚配制度的不同体现,从这点可以大胆的设想,未来研究者如果大力着眼于农田害鼠的婚配制度的内在机制,定能为鼠害防治方面的研究开辟一片新领域,并为我国农业产量的提高做出卓越的贡献。
摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第9-18页 |
1.1 黑线仓鼠研究现状 | 第9-10页 |
1.2 婚配制度的研究进展 | 第10-12页 |
1.2.1 婚配制度的定义及类型 | 第10页 |
1.2.2 婚配制度的特性 | 第10页 |
1.2.3 婚配制度形成的内在调节机制 | 第10-11页 |
1.2.4 婚配制度对有害动物的不育控制 | 第11页 |
1.2.5 婚配制度的研究方法及现状 | 第11-12页 |
1.3 多巴胺及其受体的研究进展 | 第12-15页 |
1.3.1 多巴胺及其受体概述 | 第12-13页 |
1.3.2 多巴胺及其受体对生理功能的调节 | 第13-14页 |
1.3.3 多巴胺各受体的生物学功能 | 第14-15页 |
1.3.4 多巴胺 D2 受体的研究现状 | 第15页 |
1.4 实时荧光定量 PCR | 第15-16页 |
1.5 研究的目的及意义 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-27页 |
2.1 动物采样与分组 | 第18页 |
2.2 药品与器材 | 第18-20页 |
2.3 行为学实验 | 第20-21页 |
2.4 总 RNA 的提取与反转录 | 第21-22页 |
2.4.1 总 RNA 的提取 | 第21-22页 |
2.4.2 反转录 | 第22页 |
2.5 多巴胺 D2 受体基因 cDNA 的克隆及序列测定 | 第22-24页 |
2.5.1 目的片段回收 | 第23-24页 |
2.5.2 连接转化 | 第24页 |
2.5.3 保种与测序 | 第24页 |
2.6 多巴胺 D2 受体基因 mRNA 表达的实时荧光定量 PCR 分析 | 第24-27页 |
2.6.1 目的基因与内参基因β-actin 的实时荧光定量 PCR 引物设计 | 第24-25页 |
2.6.2 荧光定量 PCR 预实验 | 第25页 |
2.6.3 脑内 DRD2 mRNA 相对表达量定量分析 | 第25-27页 |
3 结果与分析 | 第27-34页 |
3.1 不同配偶选择对黑线仓鼠行为的影响 | 第27页 |
3.2 不同配偶选择对黑线仓鼠脑内 DRD2 mRNA 表达量的影响 | 第27-33页 |
3.2.1 脑内总 RNA 提取 | 第27-28页 |
3.2.2 DRD2 cDNA 扩增 | 第28页 |
3.2.3 DRD2 cDNA Real-time qPCR | 第28-30页 |
3.2.4 DRD2 在脑内的表达 | 第30-33页 |
3.3 配偶选择下行为频次与脑内 DRD2 mRNA 表达量的相关分析 | 第33-34页 |
4 讨论与结论 | 第34-36页 |
4.1 熟悉性及亲缘关系对动物配偶选择的影响 | 第34-35页 |
4.2 多巴胺与配偶选择 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-42页 |
在校期间发表的学术论文 | 第42-43页 |
致谢 | 第43页 |
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