H9N2亚型禽流感病毒进化分析及哺乳动物感染实验研究

H9N2禽流感病毒论文 哺乳动物论文
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历史上的五次流感大流行中有四次是由低致病性流感病毒引发,而且其病原与动物流感有着密切的关系。这提示我们在关注高致病性流感病毒的同时,也需要关注在动物群体中广泛存在的低致病性流感病毒。H9亚型流感病毒被WHO列为重点监控对象,提醒人们它可能在人群中引起下一次流感大流行。近年来,H9N2亚型禽流感病毒已发展形成3个谱系。所以,了解H9N2亚型禽流感病毒的进化情况,评估H9N2亚型禽流感病毒对哺乳动物致病力和在哺乳动物间的传播能力,对于防控禽流感爆发是十分必要的。H9N2亚型流感病毒已经进化为三个谱系,包括CK/bei样毒株,G1-样毒株和korea样毒株。CK/bei样毒株在我国快速蔓延,现在已经分化成两个亚系,其代表毒株分别为A/Quail/Shantou/1038/02(QA/ST/1038/02)和A/Chicken/Shanghai /F/98 (Ck/SH/F/98)。我们对源于吉林和山东的四株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因测序后进行进化分析,发现A/Chicken/Shandong/Li-1/2009(CKSD/1)和A/Chicken/Jilin/Hu-3/2006(H9N2)(CKJL/1)属于CK/BJ/94系,并且CKSD/1与我国当前流行代表株CK/SH/F/98在进化关系中较近。而A/Chicken/JN/Li-2/2010(H9N2)(CKJN/1)和A/Chicken/JN/Li-3/2010(H9N2) (CKJN/2)进化树距离很近,但均未划分在已知的流行谱系当中。为研究H9N2亚型禽流感病毒对哺乳动物的感染能力,本实验选择伴侣宠物犬、猫和位于青海湖地区的高原鼠兔作为感染对象,选择CKSD/1毒株人工滴鼻感染犬、猫和高原鼠兔。感染犬、猫的结果显示:病毒主要在呼吸道复制,可在肺脏检测到病毒,病毒滴度为0.75~5.751gEID50/ml。14天的观察期内,犬、猫均未出现任何明显的临床症状,体温变化正常,食欲、饮欲、粪便均正常。表明H9N2亚型禽流感病毒可以通过呼吸道感染犬、猫并呈隐性感染状态。感染高原鼠兔结果显示:H9N2亚型流感病毒可以在鼠兔的上呼吸道很好的复制。并且感染的鼠兔无明显的临床症状,表明高原鼠兔可能是禽流感病毒又一天然宿主。发现H9N2亚型禽流感能够在哺乳动物体内复制后,我们以豚鼠为模型继续评价了4株H9N2病毒在哺乳动物问水平传播的能力。结果显示:名为CKSD/1和CKJL/1在豚鼠体内复制能力较强,在豚鼠鼻甲骨,气管和肺部都检测到病毒。而CKJN/1和CKJN/2在豚鼠的上呼吸道复制能力较弱,但鼻甲骨处病毒滴度相对较高;上述结果表明,H9N2亚型禽流感病毒能在豚鼠体内复制并发现鼻甲骨是流感病毒稳定复制的场所。但在豚鼠同群传播实验中,攻毒组豚鼠鼻洗液在攻毒后2-8天能够检测到流感病毒,而仅CKJN/1株接触组中豚鼠在第7d-12d间的鼻洗液中检测到较弱的病毒,其他三组中接触组豚鼠的鼻洗液中均没有检测到病毒。本实验表明我国的H9N2亚型禽流感病毒进化迅速,且病毒已经获得了在犬、猫、高原鼠兔和豚鼠等四种哺乳动物体内复制的能力,并且极有可能获得传播能力,因此进一步开展防控研究迫在眉睫。
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一篇 文献综述第9-26页
    1.1 禽流感病毒的流行与进化第9-12页
    1.2 禽流感病毒对哺乳动物的感染第12-15页
    1.3 禽流感病毒的传播机制第15-24页
    1.4 本研究的目的与意义第24-26页
第二篇 研究内容第26-49页
    第1章 四株H9N2亚型禽流感病毒HA基因的进化分析第26-31页
        1.1 材料与方法第26-27页
        1.2 结果第27-29页
        1.3 讨论第29-31页
    第2章 H9N2亚型禽流感病毒感染猫实验第31-36页
        2.1 材料与方法第31-32页
        2.2 结果第32-34页
        2.3 讨论第34-36页
    第3章 H9N2亚型禽流感病毒感染犬实验第36-40页
        3.1 材料与方法第36-37页
        3.2 结果第37-39页
        3.3 讨论第39-40页
    第4章 H9N2亚型禽流感病毒感染高原鼠兔实验第40-43页
        4.1 材料与方法第40页
        4.2 结果第40-42页
        4.3 讨论第42-43页
    第5章 H9N2亚型禽流感病毒感染豚鼠实验第43-49页
        5.1 材料与方法第43-44页
        5.2 结果第44-47页
        5.3 讨论第47-49页
第三篇 结论第49-50页
参考文献第50-59页
致谢第59-60页
个人简历第60页
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