金丝桃诱导型Bax悬浮细胞系的培养优化及Bax基因信号转导机理的初步研究

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高等植物是植物药等天然活性物质的重要来源。虽然植物是一种可再生资源，但是由于受到栽培困难、生长速度慢、无计划采伐以及近年来对天然活性物质要求不断增加等因素的影响使某些植物天然产物的供需矛盾日益提出。利用细胞全能性原理发展起来的植物细胞培养技术为植物天然活性物质生产提供了一条全新途径。在经过多年的研究攻关后，已经可以通过大规模的细胞培养技术培养生产一些植物天然活性物质。但目前制约该项技术产业化应用的核心问题之一是普遍存在的培养细胞中活性物质的低产现象，因此提高培养细胞代谢产物含量已经成为决定细胞培养技术能否实现产业化的关键因素。在分子水平上研究探讨提高植物培养细胞中目的代谢产物含量的技术和理论是目前国内外研究的重点和热点。 Bax基因是动物凋亡基因Bcl-2家族中的一员，主要作用是启动细胞凋亡过程，触发细胞过敏反应。由于植物细胞中防御性次生代谢产物增加是细胞过敏反应的典型特征之一，因此我们预测Bax基因可以影响植物细胞中次生代谢产物的合成积累。为了验证上述研究设想，我们构建了转Bax基因金丝桃细胞。本研究以本实验室已获得的金丝桃诱导型Bax基因细胞株为实验材料，经过多次继代筛选后获得

摘要	第3-7页
ABSTRAT	第7-11页
第一章引言	第15-27页
第一节本研究的意义和目的	第15-18页
第二节药用植物有效成分开发途径	第18-20页
一、从天然药用植物中直接提取	第18页
二、利用植物细胞工程获得	第18-19页
三、利用分子生物学手段生产	第19-20页
第三节植物细胞凋亡的分子机制	第20-27页
一、一氧化氮的作用	第20-22页
二、活性氧的作用	第22页
三、蛋白酶的作用	第22-23页
四、植物细胞凋亡的相关基因	第23-27页
第二章转基因金丝桃悬浮细胞系的培养优化	第27-41页
第一节转基因金丝桃悬浮细胞系的建立	第27-29页
一、材料、试剂与仪器	第27-28页
二、实验方法	第28页
三、结果与分析	第28-29页
第二节转基因悬浮细胞培养条件的优化及高产细胞系的筛选	第29-41页
一、材料、试剂与仪器	第29-30页
二、实验方法	第30-34页
三、结果与分析	第34-40页
四、讨论	第40-41页
第三章 Bax基因诱发金丝桃细胞次生代谢产物合成信号转导机理的初步研究	第41-58页
第一节 Bax基因对金丝桃细胞次生代谢产物合成的影响	第41-47页
一、材料、试剂与仪器	第41-42页
二、实验方法	第42-43页
三、结果与分析	第43-46页
四、讨论	第46-47页
第二节 NO在 Bax基因促进金丝桃细胞次生代谢产物中的作用	第47-51页
一、材料、试剂与仪器	第47-48页
二、实验方法	第48页
三、结果与分析	第48-50页
四、讨论	第50-51页
第三节活性氧在 Bax基因促进金丝桃细胞次生代谢产物中的作用	第51-54页
一、材料、试剂与仪器	第51页
二、实验方法	第51-52页
三、结果与分析	第52-53页
四、讨论	第53-54页
第四节蛋白质磷酸酶在 Bax基因促进金丝桃细胞次生代谢产物中的作用	第54-58页
一、材料、试剂与仪器	第54-55页
二、实验方法	第55页
三、结果与分析	第55-56页
四、讨论	第56-58页
第四章结论	第58-60页
参考文献	第60-67页
附录A 部分试剂的配制	第67-69页
附录B 培养基的配制	第69-70页
附录C MS母液的配制	第70-71页
致谢	第71-72页

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论文编号ABS1670573，这篇论文共72页

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