里白孢子体快繁关键技术研究

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里白(Diplopterygium glaucum)里白科里白属多年生大型蕨类植物,具有重要的药用价值和观赏价值。本研究以蕨类植物里白的孢子为试验材料,利用组织培养的方法,研究了孢子萌发诱导过程中外植体灭菌、培养基选择、植物生长调节剂的种类、蔗糖浓度、温度、光照、溶液pH值等因素对孢子繁殖的影响,此研究对于蕨类植物的组培快繁及其配子体的发育将对蕨类植物的开发利用、种质保存及种的鉴定、科属的划分、蕨类植物的起源、演化、生态分布等具有重要作用。主要结果如下:1、消毒灭菌过程中,2%NaClO和70%酒精组合灭菌效果最好,不同的灭菌时间影响到孢子繁殖的污染问题,总体上来看,2%NaClO灭菌30min,而70%酒精灭菌15s,成活率达到85.0%效果最好。2、不同的培养基类型对里白孢子繁殖的效果不同,几个培养基中,1/2MS培养基的孢子萌发率最高,达到81.1%,萌发时间也最短,在第13d便开始萌发,是较好的培养基。3、生长素和细胞分裂素对孢子的繁殖具有一定影响。总体上来说看,各种生长素均能促进里白孢子萌发,2,4-D的效果最佳,形成孢子繁殖的时间最短,为7d,并且孢子繁殖效率最高,达到70.0%。各种细胞分裂素中,TDZ的诱导效果最佳,孢子萌发时间也最短,在浓度为2.0mg·L-1诱导率最高,达到61.1%,仅需要8d左右孢子就开始萌发。所有培养基组合中,最佳的培养基组合为改良MS+2,4-D0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+TDZ3.0mg·L-1。4、不同的蔗糖浓度对里白孢子诱导影响不同,孢子诱导率随着蔗糖浓度的不同呈现不同的变化,当蔗糖浓度为30.0g·L-1时,里白孢子诱导率达到最高的91.48%。5、当光照强度为80μmol·m-2·s-1时,孢子萌发率最高,达到92.17%。孢子需要在光照条件下启动萌发,20-50μmol·m-2·s-1的低光强就能诱导其萌发。6、温度的高低也会影响到里白孢子的繁殖情况。试验结果表明,25℃时孢子萌发所需时间最短,为7d左右。7、里白孢子繁殖过程中,培养基溶液pH值5.6时的萌发率最高,为83.2%里白孢子萌发率没有显著性差异,但是当pH值达到7.6时显著降低。
摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 综述第8-19页
    1.1 蕨类植物组织培养研究进展第8-18页
        1.1.1 培养基的选择第10-12页
        1.1.2 培养条件第12页
        1.1.3 光照第12-13页
        1.1.4 温度第13-14页
        1.1.5 pH 值第14页
        1.1.6 其它因子第14-17页
        1.1.7 孢子的灭菌消毒第17-18页
    1.2 本研究的目的与意义第18-19页
2 试验材料与方法第19-21页
    2.1 试验材料第19页
    2.2 试验方法第19-21页
        2.2.1 外植体消毒方式的确定第19页
        2.2.2 培养基类型的选择第19页
        2.2.3 植物生长调节剂对孢子繁殖的影响第19-20页
        2.2.4 蔗糖浓度对孢子繁殖的影响第20页
        2.2.5 光照对孢子繁殖的影响第20页
        2.2.6 温度对孢子繁殖的影响第20页
        2.2.7 溶液 pH、琼脂浓度对孢子繁殖的影响第20-21页
3 结果与分析第21-29页
    3.1 外植体消毒方式的确定第21-22页
    3.2 不同培养基对里白孢子繁殖的影响第22-23页
    3.3 植物生长调节剂对孢子繁殖的影响第23-26页
    3.4 蔗糖浓度对里白孢子诱导的影响第26-27页
    3.5 不同光照强度对里白孢子繁殖的影响第27页
    3.6 温度对里白孢子繁殖的影响第27-28页
    3.7 pH 值对里白孢子萌发的影响第28-29页
4 结论与讨论第29-30页
参考文献第30-33页
附件第33-34页
个人简介第34-35页
导师简介第35-36页
导师简介第36-37页
致谢第37页
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