本研究旨在完善静脉一次注射小剂量[3H]Leu测定家禽内源氨基酸损失量的方法。本方法是针对静脉连续灌注同位素标记动物法的不足而提出的。一次注射法的基本设想是，依据单代谢区理论、内源AA来源和分布规律以及同位素示踪的原理，认为排泄物中内源Leu比放射性强度（SRe）随血浆游离Leu比放射性强度（SRp）呈等比例变化。因此，不同饲粮间SRe/SRp近似相等。据此，可由无氮饲粮（NFD）的SRe/SRp之值估计实际含氮饲粮的SRe值，进而推算内源Leu排泄量。本研究分三步进行：（1）不同饲粮时排泄物中内源Leu与血浆游离Leu比放射性强度之比相等的可能性证明。选择24只BW相近（1.5kg左右, BW）的尼克红蛋青鸡，随机分为4个处理，每个处理3个重复，每重复2只鸡。除绝食组外，分别饲喂NFD饲粮以及分别以豆粕、棉粕为唯一氮源的饲粮（CP为20%）。正式绝食或强饲后，立即静脉注射30μci[3H]Leu/kg WB（1ml/kg BW），分别于注射后5min、30min、4hr、24hr、36hr、48hr翅静脉采血，注射后开始准确无损收集排泄物48hr，测定各时间点的去蛋白血浆比放射性强度及48hr内排泄物的比放射性强度，通过强饲不同饲粮时，去蛋白血浆与排泄物内源Leu比放射性强度间的比例，证明SRei/SRpi =K成立（K为常数）（2）在（1）的基础上，推算出实际含氮饲粮条件下的内源AA损失量。以NFD的AA模式为内源AA模式，用K值推算出强饲两种CP为20%的饲粮时的各AA的内源损失量。（3）通过微积分分析，推算出最佳采血时间，简化该方法的操作程序，降低成本。试验的主要结果如下：<WP=4>（1）本研究进一步表明一次注射法具有一定的可行性。由于绝食组和NFD组排泄物中检出的AA全部为内源氨基酸，这两种处理48hr排泄物中内源Leu比放射性强度与相应血浆游离Leu比放射性强度的48hr内定积分值之比分别为0.0643±0.0012和0.0678±0.0008，经检验差异不显著（P＞0.05），从而证明SRe/SRp=K的成立。（2）一次注射法可以较为准确测定实际含氮饲粮时的内源AA损失量。一次注射法检测的两种CP20%实际含氮饲粮时的总AA内源损失量分别比NFD法高52.07%（豆粕组）和34.21%（棉粕组），而且这两种饲粮组的48hr内源AA损失总量分别为25081.94mg/kg DMI（豆粕组）和22136.00mg/kg DMI（棉粕组），经检验差异不显著（P＞0.05），表明在相同蛋白质水平条件下，试验动物内源氨基酸的损失量趋于恒定。（3）通过微积分分析，最佳采血时间应为静脉注射同位素[3H]Leu后35hr。
