ABA信号调节镉和镉锌互作水稻根系生长的分子—生理机制

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ABA、生长素和MAPK是植物体内重要的信号分子,本实验以水稻(Oryza sativa L.,中花11号)为材料研究了ABA信号调节镉和镉锌互作水稻根系生长的分子-生理机制。1ABA信号调节镉和镉锌互作水稻根系生长的生理机制。实验分析了Cd、Zn、ABA、ABA抑制剂(ABAi)、Cd+ABA、Cd+ABAi、 Cd+Zn、Cd+Zn+ABA和Cd+Zn+ABAi9种处理对水稻根系生长和生理的影响。结果显示,添加ABAi的处理对水稻根系生长的抑制作用大于其他处理,加Cd处理对根生长的抑制作用比无Cd处理的大,加入Zn后减轻了Cd对根系的抑制作用。ABA诱导H202的积累比ABAi的处理的多。各种处理中细胞完整性与H202的积累量及部位呈现出类似的变化规律。含量测定和Cd探针荧光定位显示,Zn减少了Cd在水稻根的积累。利用DR5-GUS检测显示,无论有无Cd或Cd+Zn, ABAi都使生长素的积累增加,相反,ABA导致生长素的积累减少。RNA和蛋白水平分析显示,单一Cd对生长素的调节与激活转录和蛋白稳定性有关,而Cd+ABA则与蛋白稳定性和转运调节有关;单一ABAi处理对生长素的调节与转录激活有关,而Cd+ABAi与蛋白从头合成和转运调控有关。2ABA信号调节镉和镉锌互作水稻根系生长的分子机制。通过半定量RT-PCR,从转录水平上分析了上述9种处理9天和13天后不同基因家族的表达情况,这些基因家族包括生长素相关基因家族(OsARFs、OsIAAs、 OsPINs、OsPID、OsYUCCAs)、细胞周期核心基因家族(OsCycs、OsCDKs)、ABA基因家族(OsABA8oxs、OsNCEDs)和OsMAPKs基因家族。结果表明,处理9天时,受ABA(含ABA和ABAi)调节的有75个基因;Cd和ABA复合处理(含Cd+ABA和Cd+ABAi)有65个基因的表达上/下调;Cd+Zn和ABA复合处理(含Cd+Zn+ABA和Cd+Zn+ABAi)后有80个基因的表达发生了变化。处理13天时,受ABA(含ABA和ABAi)调节的有82个基因;Cd和ABA复合处理(含Cd+ABA和Cd+ABAi)有69个基因的表达上/下调;Cd+Zn和ABA复合处理(含Cd+Zn+ABA和Cd+Zn+ABAi)后有87个基因的表达发生了变化。总结论:在非胁迫、Cd和Cd+Zn处理条件下ABA信号都不同程度的参与了根系生长的调节,这种调节作用是通过调控生长素积累与分布、生长素和MAPK信号途径上的基因以及细胞周期基因的表达实现的。本研究结果显示,在这3种条件下ABA调节的生长素基因、细胞周期基因和MAPK基因的表达存在差异,说明它们具有不同的信号传导途径,在这些信号传导过程中ABA、生长素和MAPK信号存在交互作用。本研究结果还表明,在不同发育时期ABA调节的基因表达水平也有明显差异,暗示ABA信号对根系生长的调节不仅与环境条件密切相关,而且还与根系的生长发育有很大关系。
摘要第4-6页
Abstract第6-7页
縮略词索引第8-9页
目录第9-11页
第一章 引言第11-17页
    1 ABA基因家族研究概况及ABA信号对根系生长的调节第11-12页
    2 生长素信号对根系生长发育的调节及其与ABA的关系第12-13页
    3 细胞周期基因研究概况及其与ABA的关系第13-14页
    4 MAPK信号级联与环境因子和ABA的关系第14-16页
    5 课题研究的目的意义第16-17页
第二章 实验材料与方法第17-22页
    1 实验材料第17页
    2 主要试剂及仪器设备第17页
    3 实验方法第17-22页
        3.1 材料处理与培养第17-18页
        3.2 水稻形态学指标统计第18页
        3.3 过氧化氢在水稻根尖分布的定性测定第18-19页
        3.4 镉、锌元素在水稻根中含量的定量测定第19页
        3.5 镉元素在水稻根尖分布的定性测定第19页
        3.6 水稻根尖细胞完整性检测第19页
        3.7 DR-GUS检测第19-20页
        3.8 RT-PCR基因表达分析第20-21页
        3.9 数据处理及分析第21-22页
第三章 ABA对镉和镉锌互作水稻根系生理和基因表达的影响第22-47页
    1 ABA对镉和镉锌互作水稻根系生长和生理的影响第22-31页
        1.1 ABA对镉和镉锌互作水稻植株高度和根系的影响第22-26页
        1.2 不同处理镉和锌在水稻根系中的积累变化第26-27页
        1.3 ABA对镉和镉锌互作水稻根系H_2O_2积累和分布的影响第27-28页
        1.4 ABA对镉和镉锌互作水稻根尖细胞完整性的影响第28页
        1.5 ABA对镉和镉锌互作水稻根系生长素分布的影响第28-31页
    2. ABA对镉和镉锌互作水稻根系基因表达的影响第31-45页
        2.1 ABA对镉和镉锌互作水稻根系ABA基因表达谱的影响第31-32页
        2.2 ABA对镉和镉锌互作水稻根系生长素基因表达谱的影响第32-37页
        2.3 ABA对镉和镉锌互作水稻根系细胞周期基因表达谱的影响第37-43页
        2.4 ABA对镉和镉锌互作水稻根系MAPK基因表达谱的影响第43-45页
    3 讨论第45-47页
实验结论第47-49页
参考文献第49-58页
附录第58-61页
致谢第61-62页
发表论文和参与科研项目第62页
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