甘精、地特、人胰岛素对3T3-L1脂肪细胞PPARγ2 mRNA表达的影响

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目的:探讨甘精胰岛素、地特胰岛素及人胰岛素对体外3T3-L1脂肪细胞PPARy2mRNA表达的影响及可能机制。方法:1.体外培养3T3-L1前脂肪细胞,分组诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。根据诱导液含有不同胰岛素将细胞随机分成4组:甘精胰岛素(注射液)组、甘精胰岛素(纯品)组、地特胰岛素(注射液)组、人胰岛素(纯品)组;按照每大组所含胰岛素浓度不同(100、500、1000nmol/L)分别分为3小组。另设10nnmol/L人胰岛素作为对照组。培养十天至脂肪细胞成熟。各组样本量为3,重复3次。2.提取细胞内总RNA,逆转录为cDNA,用实时定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测细胞内PPARγ2mRNA的相对表达水平。3.全部数据以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS13.0统计软件,多组定量资料间比较采用单因素方差分析,两两之间比较采用LSD-t检验。检验水准取α=0.05。P<0.05认为差异具有统计学意义。结果:1.不同胰岛素对3T3-L1脂肪细胞PPARγ2mRNA表达的影响:随着甘精胰岛素、地特胰岛素、人胰岛素浓度的升高,每组PPARγ2mRNA表达均逐渐升高,表明1000nmol/L胰岛素组促进细胞分化的作用强于500nmol/L,而100nmol/L组促进细胞分化的作用最弱。以上差异均具有统计学意义(P<0.05);2.同一浓度下不同胰岛素对3T3-L1脂肪细胞PPARγ2mRNA表达的影响:分别用100nmol/L、500nmol/L、1000nmol/L三种浓度诱导至细胞成熟,其结果均为人胰岛素(纯品)组促进PPARγ2mRNA表达强于甘精胰岛素(纯品与注射液)组,而地特胰岛素(纯品)组最弱。以上的差异均具有统计学意义(P<0.05)。甘精注射液组与甘精纯品组比较无明显差别。结论:1.甘精胰岛素、地特胰岛素、人胰岛素诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,在成熟的脂肪细胞中PPARγ2基因的表达均呈现出不同程度的增高,表明三种胰岛素均具有促进前脂肪细胞分化的作用,在本实验浓度范围下,随着胰岛素浓度的增加促进前脂肪细胞分化的作用增强。2.在体外,三种胰岛素相比,人胰岛素促进3T3-L1前脂肪细胞分化的作用最强,甘精胰岛素次之,地特胰岛素最弱。
英文缩略词表第5-6页
中文摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
前言第10-11页
材料与方法第11-17页
    1 材料第11-14页
    2 方法第14-16页
    3 统计学处理第16-17页
结果第17-21页
讨论第21-24页
结论第24-25页
参考文献第25-27页
综述第27-33页
    参考文献第30-33页
个人简介第33-34页
致谢第34页
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