目的:临床观察人体乳腺增生病、乳腺癌癌前病变、乳腺癌中凋亡基因Bcl-2、Bax的表达,动物实验研究温阳散结法对大鼠乳腺增生病的治疗作用及对抗凋亡基因(Bcl-2)与促凋亡基因(Bax)的影响,从促进细胞凋亡方面研究中药治疗乳腺增生病的机理。方法:临床研究选取人体乳腺增生病、乳腺癌癌前病变、乳腺癌蜡块标本,免疫组化法观察Bcl-2、Bax在各病理类型组织中的表达情况。实验研究将100只Vister雌性大鼠随机分为5组,每组20只:空白组、对照组,中药组,乳增宁组,三苯氧胺组。除空白组其他各组动物后腿内侧肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg/d,连续25天,然后肌注黄体酮4mg/kg/d,连续5天造模。将造模成功后空白组、对照组大鼠予生理盐水1ml/100g/d;乳块消汤组予乳块消汤2ml/100g/d;乳增宁组予乳增宁溶液1.5g/100g/d;三苯氧胺组予三苯氧胺溶液0.2mg/100g/d,连续治疗4周。取大鼠乳房腺体,通过HE染色、免疫组化等方法,观察乳腺组织形态学表现,及细胞抗凋亡基因(Bcl-2)与促凋亡基因(Bax)的表达情况。结果:(1)Bcl-2在乳腺增生病、乳腺癌前病变及乳腺癌的阳性表达率(%)分别为90.40±3.02、95.20±1.32、77.65±4.09,表达有明显差异(p<0.05);Bax在乳腺增生病、乳腺癌前病变及乳腺癌的阳性表达率(%)分别为76.75±3.51、64.10±3.02、38.95±2.87,表达有明显差异(p<0.05)。(2)大鼠空白组、对照组、乳块消汤组、乳增宁组、三苯氧胺组乳腺组织形态评分分别为1.00±0.00、3.38±0.39、1.55±0.22、2.10±0.19、1.33±1.43,对照组与空白组比较,具有明显差异(P<0.01),说明造模成功;乳块消汤组与对照组、乳增宁组、三苯氧胺组比较,均具有明显差异(P<0.01)。(3)大鼠空白组、对照组、乳增宁组、乳块消汤组、三苯氧胺组Bcl-2表达率分别为93.30±1.08、96.25±2.69、92.70±2.03、91.40±1.64、91.25±2.02,Bax的表达率(%)分别为75.60±0.99、72.15±2.92、74.40±1.29、73.35±2.03、73.00±2.22,乳块消汤组与对照组、乳增宁组Bcl-2、Bax的表达比较,均具有明显差异(P<0.01),乳块消汤组与三苯氧胺组Bcl-2、Bax的表达比较,具有差异(P<0.05)。结论:临床研究显示Bcl-2的表达水平在乳腺癌前病变达到最高,在乳腺增生病、乳腺癌分别降低;Bax的表达水平随着乳腺增生-癌前病变-乳腺癌病变程度的加重而降低。动物实验研究显示通过对照组与空白组组织病理形态及Bcl-2、Bax的比较,具有明显差异,说明雌激素、黄体酮联合诱导建立大鼠乳腺增生模型造模成功;应用温阳散结法治疗大鼠乳腺增生,在组织形态学上可减轻乳腺增生的病变程度,在分子水平上可下调Bcl-2、上调Bax的表达。
