不同玉米品种蛋白质指纹图谱和DNA指纹图谱的构建
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玉米是我国主要粮食和饲料作物,在我国农业生产中占有非常重要的地位。玉米存在许多不同品种,其产量和品质有很大的差异。为了有效的鉴别品种,科学地保护和利用优良种质资源,本研究利用生化标记(盐溶蛋白)和分子标记技术(RAPD、ISSR)构建了十一个玉米品种的蛋白质指纹图谱和DNA指纹图谱,并进行了聚类分析。得到以下结果:1.优化了玉米种子盐溶蛋白的分离提取体系,在盐溶蛋白提取、凝胶电泳实验过程优化的基础上,得到了稳定清晰、分辨率较高的盐溶蛋白指纹谱带。2.建立了适于玉米的RAPD反应体系,筛选出三条引物,在DNA提取、PCR扩增、凝胶电泳等实验过程的优化基础上,得到了清晰、稳定、重复性好、分辨率较高的DNA指纹图谱。3.建立了适于玉米的ISSR反应体系,筛选出四条引物,分别得到稳定清晰的DNA指纹图谱。4.对三种技术得到的指纹图谱进行了聚类分析,得到了基本一致性的结果。5.蛋白质、DNA指纹图谱均可作为玉米品种分类鉴定的标准。
摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 引言 | 第11-20页 |
1.1 玉米品种鉴定技术及方法 | 第11-18页 |
1.1.1 形态鉴定 | 第11-12页 |
1.1.2 生化鉴定 | 第12-14页 |
1.1.3 DNA 分子标记鉴定 | 第14-18页 |
1.2 指纹图谱技术在农作物品种鉴定中的应用 | 第18-20页 |
1.2.1 绘制新品种的指纹图谱,保护专利权 | 第18-19页 |
1.2.2 分析、检验品种的真实性及纯度 | 第19页 |
1.2.3 品种的亲缘关系和分类研究 | 第19-20页 |
1.3 本论文的立题意义和研究目的 | 第20页 |
2 材料和方法 | 第20-25页 |
2.1 试验材料 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-25页 |
2.2.1 蛋白质标记 | 第21-23页 |
2.2.2 DNA 分子标记 | 第23-25页 |
3 结果与分析 | 第25-38页 |
3.1 蛋白质标记 | 第25-28页 |
3.1.1 电泳条件的改进 | 第25-26页 |
3.1.2 图谱分析 | 第26-27页 |
3.1.3 统计分析 | 第27-28页 |
3.2 DNA 分子标记 | 第28-38页 |
3.2.1 DNA 提取液质量及浓度检测结果 | 第28-29页 |
3.2.2 RAPD 引物筛选及扩增结果 | 第29-30页 |
3.2.3 ISSR 引物筛选及扩增结果 | 第30页 |
3.2.4 玉米品种指纹图谱的构建 | 第30-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
4.1 实验过程中的一些方法和问题 | 第38-40页 |
4.1.1 玉米种子盐溶蛋白提取及电泳 | 第38页 |
4.1.2 关于玉米材料总 DNA 的提取及模板的制备 | 第38-39页 |
4.1.3 RAPD 与ISSR 反应稳定性及影响因素 | 第39页 |
4.1.4 污染问题 | 第39-40页 |
4.1.5 关于引物的筛选 | 第40页 |
4.2 多态性条带的选择 | 第40页 |
4.3 玉米品种的指纹图谱 | 第40页 |
4.4 盐溶蛋白标记、RAPD 和 ISSR 分子标记的一致性 | 第40-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
5.1 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录 | 第47-51页 |
作者简介 | 第51页 |
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