夏枯草提取物抗氧化活性研究

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夏枯草(Prunella vulgaris.L)为多年生草本,属唇形科夏枯草属,是我国传统中药之一。有文献记载其具有清除体内自由基,延缓衰老之功效,但国内外对此研究并不深入。本实验以夏枯草为材料,用有机溶剂提取法对夏枯草全草抗氧化物质进行提取,测定了夏枯草4种提取物清除自由基活性、金属离子螯合活性和还原力等抗氧化活性指标以及不同溶剂提取物有效物质含量,进一步讨论有效物质与抗氧化活性关系。取得了如下研究结果:(1)本实验采用了DPPH·清除活性、·OH清除活性、O2-·清除活性、金属离子螯合活性和还原力五种评价方法,对夏枯草不同溶剂提取物抗氧化活性进行研究。但由于抗氧化反应机制不同,不同评价方法中各提取物表现出不同的抗氧化活性。(2)夏枯草各提取物均具有清除3种自由基DPPH·、·OH和O2-·的活性,并且在一定浓度范围内清除能力与浓度呈正相关。当提取物浓度达到一定值后,随着浓度的增加,对自由基的清除率增加缓慢或不再增加。以IC50表示,各溶剂提取物及阳性对照BHT清除自由基活性最强的是乙酸乙酯提取物,其次是正丁醇提取物,水提物和残渣水取物的清除能力较弱。(3)夏枯草残渣水取物和水提物的金属螯合活性相当,一定范围内与浓度呈剂量依赖关系,正丁醇提取物活性很低,乙酸乙酯提取物无金属螯合活性。(4)夏枯草各提取物均具有还原力,且与提取物浓度呈剂量依赖关系。各提取物及阳性对照工业抗氧化剂BHT还原力由强到弱依次为:BHT>乙酸乙酯提取物>正丁醇提取物>水提物>残渣水取物。(5)夏枯草中乙酸乙酯提取物总黄酮含量最高,达到14.456mg/g,正丁醇提取物次之,水提物和残渣水取物中含量较少。残渣水取物中多糖含量较高,水提物中次之,而乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物中多糖含量非常低。(6)DPPH·、O2-·以及·OH的清除活性和还原力与黄酮类物质含量有着不同程度上的相关性,相关系数在0.56-0.95之间,基本在极强相关和强相关范围内;O2-·以及·OH的清除活性和金属离子螯合活性与多糖含量有一定的相关性,相关系数在0.55-0.71之间,基本在强相关和中等相关范围内。这表明黄酮类物质和多糖在夏枯草抗氧化方法中占有很重要的地位。但综合分析来看,多糖的重要程度可能不及黄酮类化合物。
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第10-22页
    1.1 前言第10页
    1.2 抗氧化剂研究概述第10-16页
        1.2.1 自由基危害及机体抗氧化机制第10-11页
        1.2.2 抗氧化剂体内作用机理第11-12页
        1.2.3 合成抗氧化剂与天然抗氧化剂第12页
        1.2.4 天然抗氧化剂来源第12-14页
        1.2.5 天然抗氧化剂活性成分第14-16页
        1.2.6 天然抗氧化剂发展趋势第16页
    1.3 夏枯草研究概况第16-20页
        1.3.1 夏枯草资源概况第16-17页
        1.3.2 夏枯草化学成分研究第17-20页
    1.4 本课题研究的目的、意义和研究内容第20-22页
        1.4.1 选题的依据及意义第20-21页
        1.4.2 课题研究的主要内容第21-22页
第二章 材料与方法第22-30页
    2.1 试验材料第22页
        2.1.1 供试植物材料与前处理第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 主要仪器第22页
    2.2 试验方法第22-30页
        2.2.1 夏枯草不同溶剂组分的制备第22-24页
        2.2.2 夏枯草总黄酮和总多糖含量测定第24-26页
        2.2.3 夏枯草提取物体外抗氧化活性测定第26-30页
第三章 结果与分析第30-38页
    3.1 夏枯草不同溶剂提取物的总黄酮和总多糖含量测定第30页
        3.1.1 夏枯草不同溶剂提取物的黄酮含量第30页
        3.1.2 夏枯草提取物总多糖的含量第30页
    3.2 夏枯草提取物的体外抗氧化活性第30-36页
        3.2.1 夏枯草提取物对 DPPH·的清除活性第31-32页
        3.2.2 夏枯草提取物对 O2-·的清除活性第32-33页
        3.2.3 夏枯草提取物对·OH 的清除活性第33-34页
        3.2.4 夏枯草提取物的还原力第34-35页
        3.2.5 夏枯草提取物的金属螯合活力第35-36页
    3.3 夏枯草抗氧化活性与黄酮类物质和多糖含量的相关性分析第36-38页
第四章 讨论第38-41页
    4.1 多方法评价体系综合评价的必要性第38页
    4.2 夏枯草抗氧化活性评价第38-39页
    4.3 夏枯草抗氧化活性与有效物质的关系第39-41页
        4.3.1 夏枯草抗氧化活性与黄酮类物质和多糖的关系第39页
        4.3.2 有效物质的协同和拮抗第39-41页
第五章 结论与展望第41-43页
    5.1 结论第41-42页
    5.2 展望第42-43页
参考文献第43-48页
致谢第48-49页
作者简介第49页
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