背景：非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)患病率逐年增高,已成为最常见的慢性肝病之一,NAFLD的发生发展机制目前尚未完全明确。UPF1是无意义编码的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)中的关键蛋白,已有研究表明UPF1在细胞DNA复制及修复中起重要作用,NMD及DNA的损伤与肝内脂质代谢及肝细胞损伤相关,但UPF1在NAFLD发病机制中起的作用尚不明确。目的：本研究通过对L02细胞及小鼠模型的实验,探讨UPF1在NAFLD发病机制中起的作用。方法：1.通过给C57BL/6小鼠MCD饮食5周建立NAFLD模型小鼠。将肝脏L02细胞置于软脂酸、油酸(两者1：2混合)的高脂环境中培养出NAFLD肝细胞。然后用油红染色法观测细胞内脂滴,收集细胞冻液,测定其中TG含量,评估建模情况。2.从小鼠肝脏组织中及FFA诱导的L02细胞中提取RNA,进行逆转录,对合成的UPF1引物进行实时荧光定量PCR,运用Western Blot方法检查UPF1蛋白的变化,比较正常小鼠肝细胞和NAFLD小鼠、正常L02细胞和脂变的L02细胞内UPF1及蛋白的变化。3.运用siRNA干扰的方法抑制NAFLD细胞模型中UPF1的表达,检测其脂肪变性程度,并进一步检测UPF1表达抑制后脂肪酸p氧化基因(PGC1α, PPARα, CPT1α)、ROS等指标的变化,探讨UPF1在非酒精性脂肪性肝病的发病中的作用。结果：1.FFA处理L02细胞后,UPF1 mRNA及UPF1蛋白表达下降；MCD饮食处理后模型小鼠UPF1 mRNA及UPF1蛋白表达下降。2.抑制L02细胞UPF1表达后,UPF1 mRNA表达显著下降,细胞内甘油三酯含量明显增加。3.抑制L02细胞UPF1表达后,PGC1αmRNA, PPARa mRNA, CPT1αmRNA表达均下降。4.抑制L02细胞UPF1表达后,ROS升高。结论：UPF1可能在NAFLD的发生、发展中发挥一定的抑制作用,UPF1被抑制可能是NAFLD的发病机制之一。UPF1被抑制后可能通过引起PGC1α, PPARα, CPT1α的表达下降,及ROS生成增多来促进NAFLD的形成。
