第一部分:脑缺血再灌注损伤后大鼠血脑屏障通透性的变化目的①实验动物模型的建立,为探讨血脑屏障在缺血再灌注后(middlecerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)的病理生理改变奠定基础。②探讨脑缺血再灌注损伤早期大鼠血脑屏障(BBB)功能障碍的变化和水肿形成的规律。方法①采用改良的Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞/再灌注试验模型,并观察模型的可靠性。②雄性SD大鼠随机分成假手术组、右侧大脑中动脉阻塞缺血2h再灌注3、6、12、24h组,应用伊文思蓝法观察再灌注后不同时间点BBB通透性变化,采用干湿重法计算脑含水量评估脑水肿。结果①成功建立了大鼠局灶性脑缺血再灌注试验动物模型。②脑缺血再灌注3h时,大鼠BBB通透性明显增加(P＜0.05),24h达高峰(P＜0.01);缺血再灌注组右侧大脑半球伊文思蓝含量与对侧相比有显著性差异(P＜10.05),与假手术组比较右侧大脑半球伊文思蓝含量有显著性差异(P＜0.05)。脑含水量变化与BBB通透性改变呈平行关系。结论缺血再灌注损伤早期,大鼠BBB完整性受到破坏,脑水肿加重,BBB的结构和功能稳定性作为缺血再灌注损伤早期关注的重点。第二部分脑缺血再灌注后核不均一性核糖核蛋白(hnRNP)A2/B1变化的研究目的:研究大鼠脑缺血再灌注损伤后核不均一性核糖核蛋白(heterogeneousnuclear ribonulcleoprotein,hnRNP)A2/B1的表达变化与再灌注时间的关系。方法:建立大鼠脑缺血再灌注损伤动物模型,测定再灌注损伤后3、6、12、24、48h在缺血侧大脑皮质四个区域hnRNP A2/B1含量变化及蛋白表达位置的改变,并与假手术对照组进行比较。结果:与假手术组比较,脑缺血再灌注3h hnRNPA2/B1表达位置出现核突、核浆易位,脑缺血再灌注24h达到高峰,再灌注48h后,核浆、核突易位降至0;hnRNPA2/B1表达量在脑缺血再灌注3h、6h、12h、24h明显下降(P＜0.01)。48h后,hnRNPA2/B1蛋白表达量明显上升(P＜0.01)。结论:hnRNP A2/B1可能在基因转录后水平参与调控缺血再灌注脑损伤。
