TSLP在动脉粥样硬化炎症反应中的作用和机制

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第一部分TSLP在动脉粥样硬化血管内的表达目的:观察人和动脉粥样硬化(AS)模型小鼠的AS血管内是否表达胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)及其与树突状细胞(DCs)的关系。方法:采取人无AS血管和18周龄的C57BL/6雄性小鼠血管作为正常对照,人有AS血管和18-22周龄C57BL/6背景ApoEE-/-AS模型小鼠病变血管为病变组,用免疫组化法检测血管中TSLP、CDllc和CD4的表达,用原位杂交技术检测血管中TSLP mRNA的表达,用双重免疫荧光法检测血管中TSLP和DCs的共表达关系。结果:在人和小鼠正常血管均未见明显TSLP表达,而在人AS病变血管与AS模型小鼠病变血管内均见TSLP及TSLPmRNA表达。双重免疫荧光染色显示TSLP表达部位周围明显DCs聚集。连续切片免疫组化染色显示同一血管内TSLP表达部位有DCs和TCs共表达。讨论:TSLP在人及AS模型小鼠的AS血管显著表达,其周围可见明显DCs, TCs聚集,这说明TSLP作为DCs的上游激活因子,可能直接参与了AS免疫炎症反应的调控。第二部分氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达TSLP目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)可否诱导血管内皮细胞产生TSLP。方法将ox-LDL (12.5,25,50,100mg/L)与培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共育12小时,在6小时和12小时进行检测,用RT-PCR检测TSLP mRNA的表达,采用免疫荧光法检测细胞胞浆中TSLP表达,用ELISA法检测细胞培养上清液中TSLP的浓度。结果在对照组HUVECs中几乎未检测到TSLP表达;在实验组,HUVECs中检测到TSLP mRNA表达,胞浆内显著表达TSLP,其上清液中TSLP浓度亦显著增高,呈剂量-时间依赖性。结论ox-LDL能够诱导血管内皮细胞表达TSLP,这可能在血管免疫炎症反应环节中起到重要作用。第三部分氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞表达TSLP目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)能否诱导血管平滑肌细胞产生TSLP.方法将ox-LDL (12.5,25,50,100mg/L)与培养人动脉平滑肌细胞(HVSMCs)共育12小时,在6小时和12小时进行检测,用RT-PCR检测TSLP mRNA的表达,采用免疫荧光检测细胞胞浆中TSLP表达,用ELISA法检测细胞培养上清液中TSLP的浓度。结果正常对照组HVSMCs中几乎无TSLP表达;在实验组,HVSMCs可检测到TSLP mRNA表达,胞浆中显著表达TSLP,其上清中TSLP的浓度显著增高,呈剂量-时间依赖性。结论ox-LDL能够诱导血管平滑肌细胞表达TSLP,这可能在血管免疫炎症反应环节中起重要作用。第四部分阿托伐他汀抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达TSLP目的:观察阿托伐他汀对ox-LDL诱导原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的影响。方法:原代HUVECs培养72小时后分为3组,对照组加50mg/L的ox-LDL培养12小时;实验组分为2组,分别加50mg/L的ox-LDL和不同浓度的阿托伐他汀培养12小时,于6小时和12小时进行检测,用ELISA法检测细胞培养上清液中TSLP的浓度,用RT-PCR检测TSLP mRNA的表达,采用免疫荧光法检测细胞胞浆中TSLP表达。结果:实验组TSLP和TSLP mRNA的表达明显低于对照组,并随阿托伐他汀浓度的增大及作用时间的延长,TSLP降低得更明显。结论:阿托伐他汀可抑制ox-LDL诱导的HUVECs表达TSLP,这可能是阿托伐他汀抗动脉粥样硬化炎症反应的机制之一。
中文摘要第6-9页
Abstracts第9-11页
前言第12-16页
    参考文献第14-16页
第一部分 TSLP在动脉粥样硬化血管内的表达第16-32页
    1.材料及方法第17-22页
    2.结果第22-29页
    3.讨论第29-30页
    参考文献第30-32页
第二部分 氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达胸腺基质淋巴细胞生成素第32-46页
    1.材料及方法第32-39页
    2.结果第39-43页
    3.讨论第43-44页
    参考文献第44-46页
第三部分 氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞表达胸腺基质淋巴细胞生成素第46-60页
    1.材料及方法第46-53页
    2.结果第53-57页
    3.讨论第57-58页
    参考文献第58-60页
第四部分 阿托伐他汀抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达TSLP第60-73页
    1.材料及方法第60-67页
    2.结果第67-70页
    3.讨论第70-71页
    参考文献第71-73页
总结第73-74页
综述第74-97页
    参考文献第86-97页
附录一 英文缩略词表及中文对照第97-99页
附录二 攻读博士学位期间主要发表的论文第99-100页
致谢第100-101页
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