内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）是兰科石斛属草本植物，是药典收录的五种石斛之一，也是最为珍稀名贵的石斛植物。由于自然繁殖率低，人工栽培技术不成熟，铁皮石斛野生资源已濒临枯竭。本文以快速繁殖的铁皮石斛胚性组织原球茎为材料，根据兰科植物与真菌共生的生理特点，选取野生铁皮石斛的内生真菌小菇属（Mycena sp.）真菌（MF24）对液体培养的原球茎进行诱导作用，进行了较系统的研究，以期改善原球茎的药用质量而使其成为铁皮石斛的药用新资源。此外，本文对铁皮石斛原球茎、金钗石斛（D.nobile Lindl.）、长距石斛（D.longicornu Lindl.）的化学成分和药理活性进行了研究，丰富石斛属植物的药用和开发研究。 一、促淋巴细胞增殖、自由基清除实验结果显示MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的药理活性有提高作用。 真菌诱导子处理的原球茎甲醇提取物（100μg／ml）对小鼠B淋巴细胞转化有促进作用，增殖率是9.36％，而对照原球茎没有这一活性，野生铁皮石斛强烈抑制B淋巴细胞转化。与对照原球茎相比，真菌诱导子处理能使原球茎甲醇提取物促T淋巴细胞转化的活性提高84.8％。10μg／ml剂量时，对照原球茎、真菌诱导子处理的原球茎、野生铁皮石斛的甲醇提取物的超氧阴离子清除率分别是24.48％、30.14％、12.72％；50％甲醇提取物清除率分别是31.95％、36.67％、18.46％。 二、通过对原球茎的化学成分研究以及它们的含量比较显示，MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的苯丙烷类和酚类化学成分含量有提高作用。首次对悬浮培养的铁皮石斛原球茎的化学成分进行了研究。共分离鉴定了16个化合物（TP1～TP16），其中1-O-p-香豆酰基-8-D-P比喃葡萄糖苷（TP1）、1-O-p-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷（TP2）在10-7mol/L时都具有极显著的超氧阴离子清除活性，清除率分别是33.08％和84.31％。真菌诱导子处理