玉米小斑病菌C小种致病特性及HMC毒素对细胞骨架微丝分布影响的研究
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玉米小斑病(Southern blight of corn)是当前国内外玉米生产区普遍流行的一种真菌性病害,在致病过程中能产生对其寄主植物具有致病活性的代谢产物,即致病毒素。本研究首先从玉米小斑病菌C小种致病力的恢复、HMC毒素的产生与培养条件的关系、玉米小斑病菌C小种致病过程与钙信号系统的关系、HMC毒素对同核异质玉米叶肉细胞原生质体的影响四个方面对玉米小斑病菌C小种致病特性进行了研究。结果表明:玉米小斑病菌C小种可采用PDA培养基与寄主叶片连续共培养的方法提高产孢量和致病力;黑暗、静止培养有利于毒素的产生;毒素的提取过程中,洗脱液的改进提高了毒素的纯度,相应地提高了毒素的致病力;钙信号途径抑制剂EGTA、Verapamil、KN-93对玉米小斑病菌分生孢子萌发和附着胞的形成过程具有抑制作用,说明钙信号途径参与了小斑病菌分生孢子萌发和附着胞的形成过程,且这种参与表现在孢子萌发和附着胞形成过程的早期;HMC毒素对C细胞质玉米叶肉细胞原生质体具有破坏作用,可使原生质体破裂、瓦解,而对N细胞质玉米叶肉细胞原生质体的破坏作用不明显,说明玉米小斑病菌C小种对C细胞质玉米的原生质体具专化破坏作用。 微丝是细胞骨架的重要成分,从细胞水平来说,许多生物学过程,需要有细胞骨架的参与。本研究还利用荧光标记和激光共聚焦显微镜相结合的方法,研究了HMC毒素对同核异质体玉米根冠细胞微丝骨架分布的影响。结果表明:HMC毒素可破坏C细胞质玉米根冠细胞微丝的分布,80μg/ml的HMC毒素使微丝的分布受到严重破坏,但同浓度的HMC毒素对N细胞质玉米根冠细胞的微丝分布的影响不明显,说明HMC毒素对C细胞质玉米根冠细胞微丝分布的影响具有专化性。HMC毒素对细胞骨架微丝分布的影响和细胞松弛素B的作用相似,但两者的机制可能不同。
中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6页 |
缩写词 | 第7-8页 |
化学试剂 | 第8-9页 |
综述 | 第9-24页 |
1 玉米小斑病菌及其专化性病害 | 第9-14页 |
1.1 玉米小斑病菌及其生理小种分化 | 第10-11页 |
1.2 玉米小斑病菌对玉米的专化侵害 | 第11-13页 |
1.3 真菌侵染与钙信号系统 | 第13-14页 |
2 植物病原真菌毒素及其作用机理研究进展 | 第14-19页 |
2.1 植物病原真菌毒素的种类 | 第15-17页 |
2.2 病原真菌毒素的致病机理 | 第17-19页 |
2.3 植物病原真菌毒素的应用 | 第19页 |
3 真菌毒素和细胞骨架 | 第19-24页 |
3.1 细胞骨架的发现 | 第19-20页 |
3.2 微丝的定义 | 第20-21页 |
3.3 微丝的装配动态 | 第21页 |
3.4 微丝的功能 | 第21-23页 |
3.5 真菌毒素对细胞骨架微丝的作用 | 第23-24页 |
序言 | 第24-26页 |
实验部分 | 第26-54页 |
第一部分 玉米小斑病菌C小种致病特性研究 | 第26-43页 |
1 玉米小斑病菌C小种菌株复壮(致病力的恢复) | 第26-29页 |
1.1 材料方法 | 第26-27页 |
1.2 结果和分析 | 第27-29页 |
2 HMC毒素的产生与培养条件的关系 | 第29-32页 |
2.1 实验材料 | 第29页 |
2.2 不同培养条件下毒素产量的测定 | 第29-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-32页 |
3 玉米小斑病菌致病过程受钙信号系统的调控 | 第32-42页 |
3.1 实验材料 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
第二部分 HMC毒素对同核异质体玉米原生质体及细胞骨架微丝分布的影响 | 第43-54页 |
1 HMC毒素的制备及活性检测 | 第43-45页 |
1.1 HMC毒素的制备 | 第43页 |
1.2 毒素的活性检测 | 第43-44页 |
1.3 结果与分析 | 第44-45页 |
2 HMC毒素对同核异质玉米叶肉细胞原生质体的作用 | 第45-46页 |
2.1 玉米叶肉细胞原生质体的制备(酶解法) | 第45页 |
2.2 HMC毒素对原生质体的影响 | 第45页 |
2.3 结果和分析 | 第45-46页 |
3 HMC毒素对同核异质体玉米根冠细胞微丝骨架分布的影响 | 第46-52页 |
3.1 材料与方法 | 第46-47页 |
3.2 结果与分析 | 第47-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
个人简历 | 第64页 |
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