目录 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一部分 文献综述 | 第12-44页 |
第一章 A20/AN1锌指蛋白研究进展 | 第12-22页 |
摘要 | 第12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 A20/AN1锌指蛋白的发现与结构特征 | 第14-15页 |
2 A20/AN1锌指蛋白的功能 | 第15-17页 |
2.1 参与生长发育及免疫反应过程 | 第15-17页 |
2.2 参与非生物胁迫响应 | 第17页 |
3 植物A20/AN1锌指蛋白参与非生物胁迫响应的研究 | 第17-19页 |
4 植物A20/AN1锌指蛋白参与生长发育及非生物胁迫响应的机制研究 | 第19-21页 |
4.1 通过蛋白互作参与生长发育及非生物胁迫响应 | 第19-20页 |
4.2 通过GA信号途径参与生长发育及非生物胁迫响应 | 第20页 |
4.3 通过泛素结合及E3活性参与生长发育及非生物胁迫响应 | 第20-21页 |
5 植物A20/AN1锌指蛋白基因家族研究展望 | 第21-22页 |
第二章 泛素-26S蛋白酶体途径及其在植物非生物胁迫中的功能研究 | 第22-44页 |
摘要 | 第22页 |
Abstract | 第22-23页 |
1 泛素-26S蛋白酶体途径 | 第23-32页 |
1.1 泛素分子特性研究 | 第23-25页 |
1.2 泛素连接级联反应 | 第25-29页 |
1.3 26S蛋白酶体基本结构及功能的研究 | 第29-30页 |
1.4 泛素-26S蛋白酶体途径 | 第30-32页 |
2 植物非生物胁迫响应及其调控 | 第32-36页 |
2.1 植物非生物胁迫响应的途径 | 第32-33页 |
2.2 植物非生物胁迫信号的调控 | 第33-36页 |
3 UPS在植物非生物胁迫中的功能 | 第36-44页 |
3.1 UPS是非生物胁迫响应所必需的 | 第36-37页 |
3.2 UPS参与激素信号途径 | 第37-41页 |
3.3 UPS参与水分胁迫信号转导 | 第41-42页 |
3.4 UPS参与冷胁迫信号转导 | 第42页 |
3.5 UPS与UV胁迫响应 | 第42-44页 |
第二部分 研究报告 | 第44-164页 |
第三章 水稻A20/AN1型锌指蛋白ZFP177参与泛素-蛋白酶体途径及非生物胁迫响应 | 第44-104页 |
摘要 | 第44-45页 |
ABSTRACT | 第45-47页 |
1 材料与方法 | 第47-64页 |
1.1 植物材料及处理 | 第47页 |
1.2 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第47页 |
1.3 Quantitative Real-time PCR分析 | 第47-48页 |
1.4 亚细胞定位分析 | 第48-51页 |
1.5 水稻转基因植株的获得及鉴定 | 第51-54页 |
1.6 转基因水稻的耐逆性分析 | 第54页 |
1.7 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第54-59页 |
1.8 ZFP177及其相关突变蛋白的原核表达分析 | 第59-61页 |
1.9 AIP1及AIP2蛋白的原核表达分析 | 第61页 |
1.10 GST Pull Down体外分析蛋白互作 | 第61-62页 |
1.11 HisPull down分析蛋白的体外互作 | 第62页 |
1.12 Western blot验证pull down捕获的互作蛋白 | 第62页 |
1.13 E3泛素连接酶活性分析 | 第62-63页 |
1.14 ZFP177过量表达转基因水稻幼苗蛋白质iTRAQ定量分析 | 第63-64页 |
2 结果和分析 | 第64-97页 |
2.1 ZFP177在水稻各个组织中及各种处理下的表达分析 | 第64-66页 |
2.2 ZFP177的亚细胞定位分析 | 第66-67页 |
2.3 ZFP177转基因材料的获得及验证 | 第67-71页 |
2.4 ZFP177过量表达转基因水稻植株的农艺性状考察 | 第71-72页 |
2.5 ZFP177过量表达转基因水稻植株的耐逆性分析 | 第72-74页 |
2.6 酵母双杂交筛选ZFP177互作蛋白 | 第74-79页 |
2.7 ZFP177与泛素互作特性分析 | 第79-85页 |
2.8 ZFP177与AIP4,AIP5互作特性分析 | 第85-87页 |
2.9 ZFP177蛋白E3活性分析 | 第87-89页 |
2.10 ZFPl77过表达转基因水稻幼苗蛋白质iTRAQ定量分析 | 第89-97页 |
3 讨论 | 第97-104页 |
3.1 ZFP177为调控蛋白 | 第97-98页 |
3.2 ZFP177及其家族蛋白与泛素互作特性 | 第98-101页 |
3.3 ZFP177及其家族蛋白与泛素-26S蛋白酶体系统的关系 | 第101-102页 |
3.4 ZFP177参与非生物胁迫反应及生长发育 | 第102页 |
3.5 ZFP177参与非生物胁迫及生长发育调控的机制 | 第102-104页 |
第四章 水稻A20/AN1型锌指蛋白ZFP181参与生长发育及非生物胁迫响应 | 第104-152页 |
摘要 | 第104-105页 |
ABSTRACT | 第105-106页 |
1 材料和方法 | 第106-117页 |
1.1 植物材料及处理 | 第106页 |
1.2 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第106页 |
1.3 Quantitative Real-time PCR分析 | 第106-107页 |
1.4 亚细胞定位分析 | 第107-108页 |
1.5 水稻转基因植株的获得及鉴定 | 第108-111页 |
1.6 转基因水稻对外源ABA的敏感性及耐逆性分析 | 第111-113页 |
1.7 转基因水稻内源激素(GA,ABA,IAA)含量测定 | 第113-114页 |
1.8 ZFP181对GA_3及PAC的响应特性分析 | 第114-115页 |
1.9 酵母双杂交筛选互作蛋白 | 第115-116页 |
1.10 ZFP181的原核表达分析 | 第116页 |
1.11 ZFP181的E3泛素连接酶活性分析 | 第116页 |
1.12 ZFP181转基因水稻的转录组分析 | 第116-117页 |
2 结果和分析 | 第117-149页 |
2.1 ZFP181在水稻中的组织表达及诱导表达特性分析 | 第117-119页 |
2.2 ZFP181的亚细胞定位分析 | 第119-120页 |
2.3 ZFP181相关转基因水稻植株的获得及验证 | 第120-127页 |
2.4 ZFP181启动子转基因水稻的GUS活性分析 | 第127-129页 |
2.5 ZFP181过量及干涉抑制表达转基因水稻植株的农艺性状考察 | 第129-132页 |
2.6 ZFP181过量及干涉抑制转基因水稻耐逆性分析 | 第132-136页 |
2.7 ZFP181过量及干涉抑制转基因水稻对外源ABA的敏感性分析 | 第136-138页 |
2.8 ZFP181对GA_3及PAC的响应特性分析 | 第138-140页 |
2.9 转基因水稻内源GA,IAA及ABA含量的测定 | 第140-141页 |
2.10 ZFP181过表达转基因水稻的转录组分析 | 第141-144页 |
2.11 ZFP181的E3泛素连接酶活性检测 | 第144-145页 |
2.12 酵母双杂交筛选ZFP181互作蛋白 | 第145-149页 |
3 讨论 | 第149-152页 |
3.1 ZFP181为调控蛋白 | 第149页 |
3.2 ZFP181参与非生物胁迫反应及生长发育 | 第149-150页 |
3.3 ZFP181参与非生物胁迫及生长发育调控的机制 | 第150-152页 |
第五章 水稻锌转运体OZT1的功能分析 | 第152-164页 |
摘要 | 第152页 |
Abstract | 第152-154页 |
1 材料和方法 | 第154-156页 |
1.1 菌株与载体 | 第154页 |
1.2 亚细胞定位载体构建及其在酵母细胞中的定位分析 | 第154页 |
1.3 酵母表达载体构建及其在酵母细胞中的表达 | 第154-155页 |
1.4 酵母感受态细胞的制备及醋酸锂法转化 | 第155页 |
1.5 酵母细胞的金属离子胁迫分析 | 第155-156页 |
2 结果和分析 | 第156-161页 |
2.1 OZT1亚细胞定位载体构建及其在酵母细胞中的定位分析 | 第156-157页 |
2.2 OZT1酵母表达载体构建及其在酵母细胞中的表达 | 第157-158页 |
2.3 酵母体内分析OZT1对金属离子胁迫的响应 | 第158-161页 |
3 讨论 | 第161-164页 |
全文结论 | 第164-166页 |
全文创新点 | 第166-168页 |
附录 | 第168-172页 |
参考文献 | 第172-192页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第192-194页 |
致谢 | 第194页 |