12-脂氧化酶基因敲除对1型糖尿病肾病小鼠肾小球内纤维连接蛋白表达的影响

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目的:在正常肾脏组织中,纤维连接蛋白(fibronectin,FN)主要存在于肾小球系膜区,彼此以纤维状结构相连接,对维持肾小球的正常结构起着非常重要的作用。FN是糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)时肾小球肥大和细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)积聚的标志性蛋白。12-脂氧化酶(12-lipoxygenase,12-LO)在DN发生发展中的重要作用已被广泛认识。本研究旨在探讨12-LO对1型糖尿病肾病小鼠肾小球内FN表达的影响。方法:用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导1型糖尿病模型。将12-LO基因敲除C57BL/6小鼠和野生型小鼠随机地分为4个组,即:野生型对照组(N=8;WT)、野生型糖尿病肾病组(N=8;WT+STZ)、12-LO基因敲除组(N=8;LOKO)、12-LO基因敲除糖尿病肾病组(N=8; LOKO+STZ)。16周后,采用RT-PCR和免疫组化方法分别检测各组小鼠肾小球内FN mRNA和蛋白表达的变化。结果:与WT组相比, WT+STZ组小鼠的血糖、肾重/体重比值及24小时尿白蛋白均明显增高(P<0.01),但LOKO+STZ组小鼠的肾重/体重比值和24小时尿白蛋白则显然低于WT+STZ组(P<0.05)。基础情况下,FN在WT组小鼠和LOKO组小鼠肾小球内的表达没有差异。与WT组相比,FN在WT+STZ组小鼠肾小球内的表达明显增加(P<0.01),然而12-LO基因敲除可以阻止FN在糖尿病小鼠肾小球内表达增加(P<0.05)。结论:12-LO基因敲除可延缓1型糖尿病肾病小鼠蛋白尿的进展,降低肾小球内FN的表达。
前言第4-5页
中文摘要第5-7页
ABSTRACT第7页
英文缩写词表第10-11页
第1章 绪论第11-18页
    1.1 糖尿病肾病主要的临床表现和病理学改变第11页
    1.2 糖尿病肾病蛋白尿的发生机制第11-15页
        1.2.1 肾脏的结构、功能出现异常第12-13页
        1.2.2 肾脏血流动力学发生改变第13-14页
        1.2.3 炎症因子第14页
        1.2.4 细胞因子和生长因子的异常第14-15页
    1.3 12-脂氧化酶第15-16页
    1.4 纤维连接蛋白第16-18页
第2章 材料与方法第18-24页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 实验动物第18页
        2.1.2 主要实验试剂第18页
        2.1.3 主要仪器第18-19页
    2.2 实验方法第19-24页
        2.2.1 动物实验主要试剂配制第19-20页
        2.2.2 动物分组第20页
        2.2.3 动物处理第20页
        2.2.4 标本的收集和处理第20-21页
        2.2.5 免疫组织化学检查第21-22页
        2.2.6 RT-PCR第22-23页
        2.2.7 统计学处理第23-24页
第3章 结果第24-27页
    3.1 小鼠的一般情况分析第24-25页
    3.2 RT-PCR 结果分析第25-26页
    3.3 免疫组织化学检查分析第26-27页
第4章 讨论第27-30页
第5章 结论第30-31页
参考文献第31-34页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第34-35页
致谢第35页
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