兔GHR基因第10外显子多态性及其与部分生产性状的关联研究
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本实验以比利时兔、天府黑兔、齐卡兔、哈白兔及加利福尼亚兔共220只肉兔为试验材料,采用单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,研究了兔GHR基因第10外显子的SNPs及其与生产性能的相关性。结果如下:SCCP分析表明,在5个肉兔品种中引物1扩增片段都发现了A、B 2个等位基因,其频率分别为0.6386和0.3614,AA、AB、BB 3种基因型频率分别为0.4273、0.4227和0.15;引物2扩增片段都发现了M、N 2个等位基因,其频率分别为0.6227和0.3773,MM、MN、NN 3种基因型频率分别为0.4364、0.3727和0.1909。进一步测序表明,引物1扩增片段多态性位点由705bp处T→C突变造成,引物2扩增片段多态性位点由810bp处C→T突变造成。2个位点都属于中度多态,PIC分别为0.3471和0.3205。不同肉兔品种生产性状最小二乘分析表明,品种效应对于活重、全净膛、屠宰率、熟肉率、料肉比等生产性状影响很大,其中天府黑兔的活重、全净膛、屠宰率的最小二乘均值显著高于其它4个品种;哈白兔的熟肉率的最小二乘均值显著高于比利时兔;对于料肉比而言,哈白兔最小二乘均值显著低于齐卡兔,与其他三个品种差异不显著。基因型与生产性状的相关性分析表明,705 SNP位点中基因型AA的活重、全净膛、屠宰率、熟肉率最小二乘均值都显著高于基因型BB(P<0.05);810 SNP位点中基因型MM的活重、全净膛、屠宰率、熟肉率最小二乘均值都显著高于基因NN(P<0.05)。705 SNP和810 SNP两位点9种基因型组合的料肉比、屠宰率最小二乘均值差异均不显著;基因型组合ABNN的活重最小二乘均值都显著高于基因型组合AANN、BBMM(P<0.05);基因型组合AAMM、ABNN、BBMN的全净膛最小二乘均值与基因型组合BBMM差异显著(P<0.05),而与其它基因型组合最小二乘均值差异不显著;基因型组合AANN、ABMM、BBMN的熟肉率最小二乘均值都显著高于基因型组合BBMM(P<0.05)。因此可考虑将GHR基因外显子10可作为影响兔部分生产性状的候选基因。
摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1 文献综述 | 第8-24页 |
1.1 动物的生长机理 | 第8页 |
1.2 生长激素受体(GHR)的作用 | 第8-9页 |
1.3 生长激素受体的调节 | 第9-11页 |
1.3.1 GHR的个体发育差异 | 第9-10页 |
1.3.2 营养状况对GHR的影响 | 第10页 |
1.3.3 内分泌因子对GHR的调节 | 第10-11页 |
1.4 GHR的结构及其介导的信号转导途径 | 第11-15页 |
1.4.1 GHR的结构 | 第11-13页 |
1.4.2 GHR的信号转导途径 | 第13-15页 |
1.5 GHR功能结构分区(突变分析) | 第15-18页 |
1.5.1 GH激活Jak2的结构基础 | 第16页 |
1.5.2 参与调控基因表达的GHR结构域 | 第16-17页 |
1.5.3 参与代谢调控途径的GHR结构域 | 第17页 |
1.5.4 参与内部化的区域 | 第17页 |
1.5.5 受体Tyr磷酸化作用的重要性 | 第17-18页 |
1.6 GHR在不同物种上的研究进展 | 第18-20页 |
1.6.1 鸡 | 第18-19页 |
1.6.2 猪 | 第19页 |
1.6.3 牛 | 第19-20页 |
1.6.4 羊 | 第20页 |
1.7 SSCP技术的研究概况 | 第20-23页 |
1.7.1 SSCP的建立与发展 | 第20-21页 |
1.7.2 PCR-SSCP方法的原理 | 第21-22页 |
1.7.3 PCR-SSCP的应用 | 第22页 |
1.7.4 SNP及其研究方法 | 第22-23页 |
1.8 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-33页 |
2.1 试验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 试验动物选择及数据采集 | 第24页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.3 引物合成 | 第25页 |
2.1.4 主要试剂及配制 | 第25-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-31页 |
2.2.1 基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 DNA浓度和纯度的检测 | 第27页 |
2.2.3 目的基因的扩增 | 第27-28页 |
2.2.4 PCR产物的检测 | 第28-29页 |
2.2.5 PCR扩增产物的SSCP分析及基因型判定 | 第29-31页 |
2.2.6 序列测定 | 第31页 |
2.3 数据分析 | 第31-33页 |
2.3.1 基因频率和基因型频率的计算 | 第31页 |
2.3.2 遗传多态性分析 | 第31-32页 |
2.3.3 Hardy-Weinberg平衡状态的检验 | 第32-33页 |
2.3.4 基因型与兔的生产性状的相关分析 | 第33页 |
3 试验结果 | 第33-41页 |
3.1 模板DNA抽提和PCR扩增结果 | 第33-36页 |
3.1.1 模板DNA的抽提结果 | 第33-34页 |
3.1.2 兔GHR基因外显子10的PCR扩增结果 | 第34页 |
3.1.3 PCR-SSCP多态性检测结果 | 第34-35页 |
3.1.4 GHR基因外显子10部分序列测序结果 | 第35-36页 |
3.2 基因的遗传特性分析 | 第36-38页 |
3.2.1 各品种2个基因座的基因频率和基因型频率分析 | 第36-37页 |
3.2.2 GHR基因外显子10的遗传纯合度、杂合度、多态信息含量分析 | 第37页 |
3.2.3 Hardy-Weinberg平衡的检验 | 第37-38页 |
3.3 兔GHR基因外显子10与生产性状的相关性分析 | 第38-41页 |
3.3.1 各基因型对生产性状的遗传效应分析 | 第38-40页 |
3.3.2 不同品种兔生产性状的比较分析 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-45页 |
4.1 关于DNA抽提的优化 | 第41-42页 |
4.2 PCR反应体系与反应条件的优化 | 第42页 |
4.3 GHR基因外显子10多态性位点的遗传特性分析 | 第42-43页 |
4.4 基因型对生产性状的影响 | 第43页 |
4.5 品种对生产性状的影响 | 第43-44页 |
4.6 GHR基因的应用前景 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52页 |
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