六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾Col-Ⅲ及Col-Ⅳ表达的影响

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实验目的:观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾Ⅲ型胶原,Ⅳ型胶原表达的影响,探讨六味地黄汤保护肾功能,延缓肾损害的作用机制。实验方法:按照随机数字表法将60只SD大鼠分为5组:正常组、假手术组、模型组、依那普利组、六味地黄汤组,每组12只。模型组、依那普利组、六味地黄汤组采用5/6肾切除术诱导大鼠肾衰模型,假手术组同期行两次手术,每次仅打开腹腔,暴露肾脏后,关腹。第二次手术后7天,对大鼠进行干预灌胃直至处死。于第8周分批处死大鼠,观察残肾组织形态学变化并用免疫组化法检测大鼠肾脏Col-Ⅲ及Col-Ⅳ的表达。实验结果:1.通过采用HE及Masson染色观察5/6肾切除术大鼠残肾组织形态学的改变,说明5/6肾切除术诱导大鼠肾损害模型复制成功,六味地黄汤组和依那普利组可减轻肾间质损害及纤维化程度;2.免疫组化半定量分析显示六味地黄汤组肾皮质Col-Ⅲ及Col-Ⅳ的表达少于模型组;3.六味地黄汤能降低血BUN、Scr水平,减少24小时尿蛋白定量等。实验结论:六味地黄汤可能通过减少细胞外基质的积聚,下调Col-Ⅲ、Col-Ⅳ的表达,使细胞基质成分合成减少,从而减轻炎症反应和纤维化程度,达到防止肾间质纤维化、保护肾脏的作用。
中文摘要第5-6页
英文摘要第6-7页
缩略词表第8-9页
引言第9-11页
第一部分 材料与方法第11-18页
    1. 实验材料第11-12页
        1.1 实验药物第11页
        1.2 主要试剂第11页
        1.3 主要仪器第11-12页
        1.4 实验动物第12页
    2. 实验方法第12-17页
        2.1 实验分组及给药第12-13页
        2.2 药物剂量换算方法第13页
        2.3 造模方法第13-14页
        2.4 标本采集和处理第14页
        2.5 观察指标及检测方法第14-17页
    3. 统计方法第17-18页
第二部分 结果与分析第18-28页
    1. 大鼠行为和体态变化第18页
    2. 术后大鼠体重变化情况第18-20页
    3. 肾脏大体肉眼观第20页
    4. 血清肌酐、尿素氮及24小时尿蛋白定量检测第20-23页
    5. 组织形态学观察第23-24页
        5.1 HE染色病理观察第23-24页
        5.2 Masson染色病理观察第24页
    6. 大鼠残肾Co1-Ⅲ及Co1-Ⅳ表达的观察第24-28页
        6.1 Co1-Ⅲ在肾间质的表达与定量分析第24-25页
        6.2 Co1-Ⅳ在肾间质的表达与定量分析第25-28页
第三部分 讨论第28-40页
    1 模型的选择第29-30页
    2 细胞外基质与肾间质纤维化第30页
    3 Co1-Ⅲ与肾间质纤维化第30-31页
    4 Co1-Ⅳ与肾间质纤维化第31-33页
    5 ACEI机理第33-34页
    6 中医对肾间质纤维化的认识第34-36页
    7 六味地黄汤第36-39页
    8 实验结果分析第39-40页
第四部分 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-45页
附图第45-50页
综述第50-55页
    参考文献第54-55页
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