不同配比的功能性脂肪酸对摄入反式脂肪酸大鼠的血脂及组织脂肪酸代谢的影响

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动脉粥样硬化形成的关键因素为脂蛋白代谢紊乱、内皮损伤与炎症反应。TFA贡献于动脉粥样硬化形成也是由这三个关键因素所引发的。流行病学已经证实TFA对血脂产生了负的影响(LDL-C和TG升高,HDL-C降低),增加了系统炎症和内皮损伤。脂肪酸的含量、种类与脂肪酸在脂类分子中的酰化位置是影响脂类营养的重要因素,其含量与位置分布决定了脂类的吸收、代谢和功能。脂肪酸在甘油三酯的酰化位置影响乳糜微粒等脂蛋白在体内的清除速度,直接影响了甘油三酯在体内的代谢,但TFA在组织脂质中的位置分析还未见报道。本研究模拟2002年中国膳食调查中脂肪酸所占的能量比,并参考已发表的实验数据,观察不同双键结构脂肪酸与供能占8%的TFA相互作用对大鼠脂质代谢的影响。设定大鼠实验饲料中总脂肪供能为33%,各实验组TFA占总供能8%,其中实验1、2和3组18:1n-9(油酸)、18:2n-6(亚油酸)、18:3n-3(亚麻酸)各占总供能6%,实验4组为脂肪酸配比适宜的对照组(n-6/n-3=4.38),亚油酸与亚麻酸共占供能的6.3%,实验5组为以棕榈酸为主的饱和脂肪酸对照组,饱和脂肪酸占供能的9.8%(其余四个实验组的饱和脂肪酸占供能约为4.4%)。主要研究结果如下:1.TFA摄入会引起大鼠血脂代谢紊乱,HDL-C降低,TG升高。在摄入等量TFA的各实验组中,添加多不饱和脂肪酸的实验组,特别是以亚油酸和亚麻酸为主的必需脂肪酸组(实验3、4组)明显增加了HDL-C/TC与HDL-C/LDL-C,且升高了LPL与HL的活力,其中多不饱和脂肪酸配比适宜的实验4组(n-6/n-3=4.38)升高更为明显。在评估胆固醇代谢上,HDL-C/TC与HDL-C/ LDL-C作为血脂的指标比单纯地比较LDL-C与HDL-C更有意义。以TFA为主的配方油脂对炎症因子CRP与血糖的影响不大。2.摄入不同配比的功能性脂肪酸与TFA改变了大鼠的组织脂肪酸构成。大鼠的组织脂肪酸与膳食脂肪酸在趋势上基本保持一致。由于功能和代谢上的差异,其中脂肪组织脂肪酸组成与膳食更为贴近,能更好地反应映膳食组成。TFA在脑、心脏、肾脏、小肠、肝脏、红细胞膜、肌肉、脾脏与脂肪组织中的含量为0.35%、7.32%、7.33%、7.56%、7.69%、8.60%、8.82%、9.19%、13.45%。不同组织对TFA的代谢和累积存在差异性,脂肪组织累积最多。顺式油酸(9c18:1n-9)、亚麻酸(18:3n-3)与TFA在体内可能存在竞争,有降低组织TFA的影响。18:2n-6对TFA影响不大。SFA有明显促进TFA沉积的效应。3.植物油与大鼠组织TG的脂肪酸位置分布存在差异。大鼠的肝脏和小肠组织,在sn-1,3-TG优先分布SFA、trans-18:1、EPA、DPA与DHA; sn-2-TG优先分布cis-18:1与亚油酸,其中亚油酸几乎全部分布在sn-2-TG上。在植物油中,以cis-18:1、亚油酸、亚麻酸为主的不饱和脂肪酸优先分布在TG的sn-2位上,且sn-2位的不饱和脂肪酸含量都在95%以上;而SFA基本都分布在sn-1,3位上。4.TFA在TG的含量高于其在磷脂PC与PE上的含量。TFA主要分布在TG的sn-1,3位;在磷脂上,TFA则优先分布在sn-1位。该分布规律与SFA较为类似,但TFA含量的位置分布差异程度低于SFA,与TFA的化学性质介于SFA与不饱和脂肪酸之间的规律一致。TFA的位置分布趋势在不同实验组保持一致。摄入高亚麻酸可以降低大鼠肝脏、小肠与脂肪组织中TG上TFA的含量;与油酸和亚麻酸相比,亚油酸的摄入使大鼠组织TG上TFA含量较高。在油酸、亚油酸、亚麻酸影响大鼠组织TFA在PC、PE及其sn-1-PC或PE、sn-2-PC或PE上沉积方面,没有观察到明显的差异。5.小肠的PC与PE中累积PUFA,且PE中PUFA含量远高于其在PC中的含量;肝脏的PUFA含量在TG, PC与PE间差异不大。肝脏和小肠组织中PC与PE的sn-1位优先分布SFA与MUFA, sn-2位优先分布PUFA。
摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第1章 引言第12-25页
    1.1 概述第12页
    1.2 反式脂肪酸摄入来源及摄入量第12-14页
        1.2.1 外源性摄入的反式脂肪酸第12-14页
        1.2.2 内源性产生的反式脂肪酸第14页
    1.3 反式脂肪酸的体内代谢第14-16页
    1.4 反式脂肪酸的生理影响第16-19页
        1.4.1 流行病学研究第16-17页
        1.4.2 反式脂肪酸对心脑血管疾病的影响第17-18页
        1.4.3 反式脂肪酸与其他疾病第18-19页
    1.5 反式脂肪酸对模型动物脂肪代谢的影响第19-23页
        1.5.1 反式脂肪酸对动物脂质代谢的影响第19-21页
        1.5.2 脂质代谢动物模型的选择第21-23页
    1.6 研究的意义和目的第23-25页
        1.6.1 课题来源第23页
        1.6.2 研究价值与意义第23-24页
        1.6.3 主要研究内容第24-25页
第2章 不同配比的功能性脂肪酸对摄入TFA大鼠血脂,血糖,脂酶与CRP的影响第25-37页
    2.1 前言第25页
    2.2 实验材料与设备第25-26页
        2.2.1 实验动物及原料第25-26页
        2.2.2 试剂第26页
        2.2.3 实验仪器第26页
    2.3 实验方法第26-31页
        2.3.1 动物实验进程第26-27页
        2.3.2 动物实验饲料配方的确定第27-30页
        2.3.3 通过进食量确定灌胃量第30页
        2.3.4 大鼠喂养条件第30页
        2.3.5 血清中肝素前脂蛋白脂酶(Lipoptetin Lipase,LPL)和肝脂酶(Hepatic Lipase,HL)的测定第30页
        2.3.6 大鼠血脂,血糖和CRP的的测定第30页
        2.3.7 数据处理第30-31页
    2.4 实验结果第31-34页
        2.4.1 实验大鼠体重变化第31页
        2.4.2 实验大鼠进食量变化第31-32页
        2.4.3 实验大鼠血脂变化第32-33页
        2.4.4 血糖和脂酶第33-34页
        2.4.5 炎症因子CRP第34页
    2.5 讨论第34-36页
        2.5.1 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠血脂的影响第34-35页
        2.5.2 TFA引起大鼠脂肪酸代谢异常可能与降低LPL和HL活性有关第35-36页
    2.6 本章小结第36-37页
第3章 不同配比的功能性脂肪酸对摄入TFA大鼠血红细胞膜及组织脂肪酸的影响第37-55页
    3.1 前言第37页
    3.2 实验材料与设备第37-38页
        3.2.1 样品第37-38页
        3.2.2 试剂第38页
        3.2.3 实验仪器第38页
    3.3 实验方法第38-40页
        3.3.1 样品处理第38-39页
        3.3.2 脂肪酸甲酯化第39页
        3.3.3 气相色谱分析第39-40页
        3.3.4 数据处理第40页
    3.4 实验结果第40-52页
        3.4.1 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠血红细胞膜脂肪酸组成影响第40-42页
        3.4.2 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠肝脏脂肪酸组成影响第42-43页
        3.4.3 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠皮下脂肪脂肪酸组成影响第43-45页
        3.4.4 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠脑组织脂肪酸组成影响第45-46页
        3.4.5 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠小肠脂肪酸组成影响第46-48页
        3.4.6 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠心脏脂肪酸组成影响第48-49页
        3.4.7 不同脂肪酸构成比对摄入TFA大鼠脾脏、肌肉、肾脏脂肪酸组成影响第49-52页
    3.5 讨论第52-53页
        3.5.1 TFA在不同组织中沉积的差异第52页
        3.5.2 不同功能性脂肪酸对TFA在组织中沉积的影响第52-53页
    3.6 本章小结第53-55页
第4章 不同配比的功能性脂肪酸对摄入TFA大鼠肝脏、小肠与脂肪组织中甘油三酯和磷脂位置分布的影响第55-81页
    4.1 前言第55页
    4.2 实验材料与设备第55-57页
        4.2.1 原料第56页
        4.2.2 试剂第56页
        4.2.3 实验仪器第56-57页
    4.3 实验方法第57-60页
        4.3.1 样品处理及肝脏磷脂含量的测定(AOCS Ja 7b-91)第57-58页
        4.3.2 组织脂质中甘油三酯的纯化及胰脂肪酶对甘油三酯的酶解第58-59页
        4.3.3 组织脂质中磷脂的纯化及磷脂酶A2对磷脂的酶解第59页
        4.3.4 脂肪酸甲酯的制备第59-60页
    4.4 实验结果第60-76页
        4.4.1 肝脏中PC的含量第60页
        4.4.2 原料油TG位置分析第60-63页
        4.4.3 TLC纯化TG与胰脂肪酶水解产物的鉴定第63-64页
        4.4.4 TLC纯化PC、PE与磷脂酶A_2水解产物的鉴定第64页
        4.4.5 大鼠肝脏、小肠和脂肪组织TG、PC和PE的位置分布第64-76页
    4.5 讨论第76-80页
        4.5.1 组织中脂质成分与不同脂质成分上脂肪酸含量的差异第76-77页
        4.5.2 大鼠组织中脂肪酸在TG与磷脂上位置分布的特点第77-78页
        4.5.3 不同配比的功能性脂肪酸对摄入TFA大鼠肝脏、小肠与脂肪组织中甘油三酯和磷脂位置分布的影响第78-80页
    4.6 本章小结第80-81页
第5章 结论与展望第81-83页
    5.1 结论第81-82页
        5.1.1 摄入不同配比的功能性脂肪酸与TFA改变了大鼠的血脂结构第81页
        5.1.2 摄入不同配比的功能性脂肪酸与TFA改变了大鼠的组织脂肪酸构成第81页
        5.1.3 植物油与动物组织甘油三酯的脂肪酸位置存在差异第81-82页
        5.1.4 大鼠磷脂中脂肪酸位置分布第82页
        5.1.5 摄入不同配比的功能性脂肪酸对TFA在大鼠组织TG与PC和PE位置分布的影响第82页
    5.2 进一步工作方向第82-83页
致谢第83-84页
参考文献第84-91页
攻读学位期间的研究成果第91页
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