DON对仔猪海马神经细胞的毒性作用研究

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论文详情
致谢第4-5页
中文摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
中英文缩写词第12-13页
文献综述第13-21页
引言第21-22页
1 材料与方法第22-32页
    1.1 主要试验材料第22-23页
    1.2 主要仪器第23页
    1.3 仔猪海马神经细胞的培养及处理第23-24页
        1.3.1 细胞的培养第23-24页
        1.3.2 细胞的冻存与复苏第24页
    1.4 DON母液的配制及试验分组第24页
    1.5 仔猪海马神经细胞的形态学观察第24-25页
        1.5.1 细胞形态观察第24-25页
        1.5.2 细胞超微结构形态学观察第25页
        1.5.3 细胞核形态学观察第25页
    1.6 细胞活性检测第25页
    1.7 LDH漏出率检测第25-26页
    1.8 5-HT含量检测第26页
    1.9 钙稳态相关指标检测第26-28页
        1.9.1 细胞内Ca~(2+)、CaM含量检测第26页
        1.9.2 细胞内CaMmRNA表达量检测第26-28页
    1.10 Annexin V-FITC/PI双染法检测DON对仔猪海马神经细胞凋亡率的影响第28页
    1.11 Western blotting法检测MAPKs信号通路相关蛋白表达第28-30页
        1.11.1 细胞总蛋白的提取第28-29页
        1.11.2 细胞总蛋白含量的测定第29页
        1.11.3 SDS电泳浓缩胶和分离胶的配制第29页
        1.11.4 WB第29-30页
    1.12 凋亡基因Bax、Bcl-2mRNA表达量的检测第30-31页
        1.12.1 引物设计与合成第30页
        1.12.2 细胞总RNA的提取第30-31页
        1.12.3 反转录合成cDNA第31页
        1.12.4 实时荧光定量PCR第31页
    1.13 数据处理第31-32页
2 结果与分析第32-40页
    2.1 DON对仔猪海马神经细胞形态学的影响第32-34页
        2.1.1 细胞生长状态的变化第32-33页
        2.1.2 细胞超微结构的变化第33-34页
        2.1.3 细胞核的变化第34页
    2.2 DON对仔猪海马神经细胞存活率以及细胞膜完整性的影响第34-35页
    2.3 DON对仔猪海马神经细胞神经递质5-HT的影响第35页
    2.4 DON对仔猪海马神经细胞钙稳态相关指标的影响第35-36页
    2.5 DON对仔猪海马神经细胞凋亡率的影响第36-37页
    2.6 DON对MAPKs信号通路相关蛋白表达量的影响第37-38页
    2.7 DON对凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达量的影响第38-40页
3 讨论第40-45页
    3.1 DON对仔猪海马神经细胞形态学的影响第40-41页
    3.2 DON对仔猪海马神经细胞存活率及细胞膜完整性的影响第41页
    3.3 DON对仔猪海马神经细胞钙稳态及神经递质分泌的影响第41-42页
    3.4 DON对MAPKs信号通路相关蛋白的影响第42-43页
    3.5 DON对凋亡相关基因表达的影响第43-45页
4 结论第45-46页
参考文献第46-55页
附录第55-56页
作者简介第56-57页
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