DON对仔猪海马神经细胞的毒性作用研究
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论文详情
致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
中英文缩写词 | 第12-13页 |
文献综述 | 第13-21页 |
引言 | 第21-22页 |
1 材料与方法 | 第22-32页 |
1.1 主要试验材料 | 第22-23页 |
1.2 主要仪器 | 第23页 |
1.3 仔猪海马神经细胞的培养及处理 | 第23-24页 |
1.3.1 细胞的培养 | 第23-24页 |
1.3.2 细胞的冻存与复苏 | 第24页 |
1.4 DON母液的配制及试验分组 | 第24页 |
1.5 仔猪海马神经细胞的形态学观察 | 第24-25页 |
1.5.1 细胞形态观察 | 第24-25页 |
1.5.2 细胞超微结构形态学观察 | 第25页 |
1.5.3 细胞核形态学观察 | 第25页 |
1.6 细胞活性检测 | 第25页 |
1.7 LDH漏出率检测 | 第25-26页 |
1.8 5-HT含量检测 | 第26页 |
1.9 钙稳态相关指标检测 | 第26-28页 |
1.9.1 细胞内Ca~(2+)、CaM含量检测 | 第26页 |
1.9.2 细胞内CaMmRNA表达量检测 | 第26-28页 |
1.10 Annexin V-FITC/PI双染法检测DON对仔猪海马神经细胞凋亡率的影响 | 第28页 |
1.11 Western blotting法检测MAPKs信号通路相关蛋白表达 | 第28-30页 |
1.11.1 细胞总蛋白的提取 | 第28-29页 |
1.11.2 细胞总蛋白含量的测定 | 第29页 |
1.11.3 SDS电泳浓缩胶和分离胶的配制 | 第29页 |
1.11.4 WB | 第29-30页 |
1.12 凋亡基因Bax、Bcl-2mRNA表达量的检测 | 第30-31页 |
1.12.1 引物设计与合成 | 第30页 |
1.12.2 细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
1.12.3 反转录合成cDNA | 第31页 |
1.12.4 实时荧光定量PCR | 第31页 |
1.13 数据处理 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-40页 |
2.1 DON对仔猪海马神经细胞形态学的影响 | 第32-34页 |
2.1.1 细胞生长状态的变化 | 第32-33页 |
2.1.2 细胞超微结构的变化 | 第33-34页 |
2.1.3 细胞核的变化 | 第34页 |
2.2 DON对仔猪海马神经细胞存活率以及细胞膜完整性的影响 | 第34-35页 |
2.3 DON对仔猪海马神经细胞神经递质5-HT的影响 | 第35页 |
2.4 DON对仔猪海马神经细胞钙稳态相关指标的影响 | 第35-36页 |
2.5 DON对仔猪海马神经细胞凋亡率的影响 | 第36-37页 |
2.6 DON对MAPKs信号通路相关蛋白表达量的影响 | 第37-38页 |
2.7 DON对凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达量的影响 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-45页 |
3.1 DON对仔猪海马神经细胞形态学的影响 | 第40-41页 |
3.2 DON对仔猪海马神经细胞存活率及细胞膜完整性的影响 | 第41页 |
3.3 DON对仔猪海马神经细胞钙稳态及神经递质分泌的影响 | 第41-42页 |
3.4 DON对MAPKs信号通路相关蛋白的影响 | 第42-43页 |
3.5 DON对凋亡相关基因表达的影响 | 第43-45页 |
4 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-55页 |
附录 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
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